支原体DNA抽提Kit被污染后有哪些表现

支原体DNA抽提Kit特点及操作步骤  

特点  

1.符合欧洲药典的要求。  

2.从细胞上清和生物制品中，均可分离支原体DNA，全程只需30分钟。  

3.洗脱DNA纯度高，体积50μl，保证PCR最大的灵敏。  

细胞被支原体污染后的表现  

①细胞生长缓慢  

②细胞变形  

③培养基中碎片增加  

④细胞易聚团  

⑤镜下观察有小黑点  

⑥培养基提前变色  

操作步骤  

试剂盒组分  

Spin columns（核酸纯化住）、Collection tubes（收集管）、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液

该试剂盒的设计满足欧洲药典和日本药典对于不同类型样本（如软骨细胞、血清、细胞培养上清）在DNA抽提后的检测标准。可直接检测细胞上清（研究领域），或者先对细胞培养物富集，或先抽提DNA。该试剂盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。

检测原理：

该试剂盒扩增柔膜体对应的16S rRNA上的特异序列， 而真核细胞和其他细菌DNA不会被扩增。

试剂盒说明书同时包括细胞培养上清筛查和遵循欧洲药典和日本药典检查的流程，包括对DNA抽提和对样本体积的规定。整个检测小于3小时。并且与ELISA、荧光染色和培养法不同的是，无须活支原体。和一些生化和细胞学方法相比，PCR具有更高的灵敏度和准确性。