实验室使用O157显色培养基，是如何操作的

 　O157显色培养基的操作步骤：

　　1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液；

　　2、取25克样品液加入225mlmEC肉汤或mTSB肉汤中，36℃增菌培养18-24小时；

　　3、用3mm接种环取1环增菌液，划线接种到O157菌显色培养基上，做2个平板；

　　4、36℃培养18-24h，O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色，菌落周围没有蓝色晕圈；大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色，菌落周围有蓝色晕圈；其它细菌显蓝色、黄色或无色；

　　5、对典型菌落可做O157:H7菌血清学试验和全套生化试验。

　　注：必须在36℃培养24小时内判读结果，以免菌落颜色发生变化。

　　操作

　　称取瓶内干粉，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按29.2g/L的比例扩大或缩小。

　　将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中，充分搅拌溶解。

　　加热至100℃，并按常规不断搅拌。如果用高压灭菌锅，不要加压，加热不能超过100℃。混合物也可以在微波炉内加热，煮沸后，立即移出微波炉并轻轻搅拌，而后再移入微波炉继续加热，直至琼脂等*溶解（大量气泡代替泡沫产生，大约需要2分钟）。

　　将培养基冷却至45-50℃后，倾倒于培养皿或试管中。

　　注1：如果需要选择性更强的培养基，可在48℃时加入亚碲酸钾溶液，使浓度为2.5mg/l。

　　注2：如果标本中含有较多的变形杆菌，可在48℃时加入头孢克肟，使其浓度为0.025mg/l。

　　注3：如果标本中含有较多的假单胞菌和/或气单胞菌，可在48℃时加入西苏罗锭（头孢磺碇），使其浓度为5mg/l。