维生素测定培养基生产和使用容易遇到的问题

　　

　　微生物法测定食品中的维生素B12、叶酸是国家食品安全标准中的方法。因其检出限低、灵敏度高、测定结果准确可靠，受到了国内的广泛青睐。在该方法中要用到三种培养基：贮存菌用培养基、接种菌用培养基、维生素测定用培养基。其中维生素测定用培养基重要，也为关键。

　　

　　鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。半固体培养基指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。脱水培养基又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

　　

　　维生素测定培养基生产和使用常见问题：

　　

　　1.维生素测定培养基能用肉眼判断其pH值吗？

　　

　　答：维生素测定培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。

　　

　　2.维生素测定培养基的缓冲系统是什么？

　　

　　答：平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。

　　

　　3.谷氨酰胺溶液和碳酸氢钠的配制方法是什么？

　　

　　答：以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制为例：称取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分搅拌混匀。用0.2μm滤膜正压过滤除菌。溶液应在4℃下避光保存，2周内使用。

　　

　　以7.5%NaHCO3的配制为例：称取NaHCO37.5g溶于100ml蒸馏水中过滤除菌。

　　

　　4.什么培养基中可以省去加酚红？

　　

　　答：酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除，但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。