如何搞定分子实验室中的核酸污染？

分子实验室作为科学研究和临床诊断的重要场所，其环境的清洁与无污染对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。然而，由于核酸污染的高风险性，分子实验室中常常面临核酸污染的问题，这不仅影响实验结果的准确性，还可能误导科学研究和临床诊断。

一、核酸污染的来源

1. 实验室环境

实验室环境中的空气、台面、设备和实验材料都可能成为核酸污染的来源。空气中的尘埃颗粒、实验台上的残留物以及未清洁干净的仪器都可能携带核酸分子。此外，实验室内频繁的人员流动和物品交换也可能增加核酸污染的风险。

2. 实验人员

实验人员自身是核酸污染的重要来源。皮肤、头发、呼吸道以及衣物上的细菌和病毒都可能含有核酸。实验人员在操作过程中如果不注意规范，如不佩戴手套或口罩，容易将核酸带入实验体系中。

3. 试剂和耗材

实验中使用的试剂和耗材如果未经过严格的无核酸处理，也可能成为污染源。例如，某些商业试剂中可能含有微量的核酸，或者实验用的塑料耗材在制造和包装过程中受到了污染。

4. 交叉污染

在进行多个实验或处理多个样本时，如果操作不当，可能会导致样本之间的交叉污染。例如，移液器头的重复使用或者不正确的样本处理方法都会引起这种问题。

二、防污染措施

1. 严格实验室功能分区

将实验室划分为不同的功能区域，如试剂准备区、标本制备区、PCR扩增区及分析区等，并确保各区域之间有足够的隔离。实验器材应专用，避免交叉使用。

2. 规范实验操作

实验人员应严格遵守操作规程，佩戴手套、口罩等防护用品，避免将自身携带的核酸带入实验体系。同时，在操作过程中应注意避免反应液飞溅、气溶胶产生等可能导致污染的行为。

3. 试剂和耗材的无核酸处理

确保实验中使用的试剂和耗材经过严格的无核酸处理。对于商业试剂，应选择经过认证的、无核酸污染的产品。对于实验耗材，如塑料管、移液器头等，应在使用前进行清洁和消毒。

4. 设立阴阳性对照

每次实验务必设立阴阳性对照，以验证PCR反应的可靠性和扩增系统的可信性。同时，通过设立对照实验，可以及时发现并排除可能的污染因素。

三、核酸污染的清除方法

1. 实验室环境清洁

实验室每次检测完毕后，应对环境进行清洁。可以使用房间固定和/或可移动紫外灯进行紫外照射2小时以上，以杀灭空气中的微生物和核酸分子。同时，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精对台面、地面等进行清洁消毒。

2. 工作台面及设备清洁

每天实验后，应对工作台面、移液器、试管架等设备进行清洁消毒。可以使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。对于生物安全柜等关键设备，应在使用后进行全面清洁和消毒，并关闭紫外灯照射30分钟。

3. 转运容器消毒

转运及存放标本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。确保容器内外表面无核酸残留。

4. 专门去污染设备

对于难以清除的核酸污染，可以使用专门的实验室污染去除仪进行处理。这些设备能够高效去除实验室中的核酸污染，确保实验环境的清洁和无菌。

5. 应急处理

一旦发生核酸污染事件，应立即停止检测工作，并查找污染源和明确污染范围。根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施，如使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒、过氧化氢加热熏蒸等。同时，保持实验室空间密闭，避免污染物扩散。

结论

分子实验室中的核酸污染是一个复杂而严峻的问题，但通过严格的实验室管理、规范的实验操作、有效的防污染措施以及及时的污染清除方法，我们可以有效地降低核酸污染的风险，确保实验结果的准确性和可靠性。只有这样，我们才能为科学研究和临床诊断提供坚实的技术支持。