在细胞实验过程中,不仅要预防细菌污染,还有注意避免发生真菌污染。
细胞被真菌污染后,细胞生长状态变化会发生改变。细胞生长速度通常会变慢。这是因为真菌会与细胞竞争营养物质,同时可能产生对细胞有害的代谢产物。形态变化:虽然真菌污染初期细胞形态可能不会有明显变化,但随着污染的加重,细胞可能会因为营养耗尽和毒性作用而逐渐脱落死亡。
真菌污染会严重影响细胞培养实验的准确性和可靠性,导致实验数据失真,甚至可能导致整个实验失败。如果污染严重且未及时处理,可能会导致宝贵的细胞株丢失并在实验室造成交叉污染,给科研工作带来巨大损失。
在日常培养细胞的过程中,可以预防性添加细胞真菌抑制剂,来对细胞进行保护,以德国MB公司的Funox®为例,该试剂是一种用于培养基的添加剂,其中含有纳他霉素,纳他霉素是一种天然存在的抗菌剂,可保护细胞培养物免受各种常见真菌和酵母污染物的侵害。
Funox®的使用方法:
建议在两种不同的浓度下使用该产品:
1、用于预防的细胞培养基添加剂:
将 1 ml Funox® 添加到一批 500 ml 完整的即用型细胞培养基中(1:500 稀释终浓度 10 μg/ml 作为预防性产品进入细胞培养物中)
2、消除细胞培养基处理(在污染的早期阶段):
a) 将 2.5 ml Funox® 加入 500 ml 新鲜制备的细胞培养基中。
b) 通过分流或更换培养基,用含有 Funox® 的全培养基替换污染细胞培养物的培养基(1:200 稀释,终浓度 25 μg/ml,以消除现有的真菌污染)
我们建议在污染晚期阶段的情况下丢弃细胞培养物。