如何预防细胞培养体系发生真菌污染？

真菌污染会严重影响细胞代谢、生长和活力，并降低转染效率，从而影响结果的可重复性。

真菌污染的主要来源是通过空气传播途径、非无菌设备和试剂，或不良的无菌技术。真菌主要以悬浮液的形式在培养基中生长，但也可以附着在细胞或生长血管上。在显微镜下，它们可以被识别为培养基表面的小孤立菌落，并通过延长生长导致培养基浑浊。在污染的晚期阶段，真菌可能会增加细胞培养基的 pH 值，导致含酚红的培养基看起来色调较浅。

真菌污染的具体表现：

培养液变化：培养细胞受真菌污染后，培养液中可能会漂浮着白色或浅黄色的小点，有的呈散在生长。这些真菌污染在初期可能不会引起培养液的明显混浊，但随着时间推移，污染可能逐渐加重。

镜下观察：在倒置显微镜下，可以观察到丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链状排列。对于念珠菌和酵母菌等真菌，它们可能呈卵圆形态，散在于细胞周边和细胞之间生长。

一般遇到细胞被真菌污染的情况，我们建议直接将细胞丢弃，并对培养环境进行清洁消毒。如果遇到真菌污染早期，且不能随意丢弃细胞的情况，建议使用细胞专用的真菌清除试剂，例如：德国MB公司生产的 Funox®，该真菌祛除试剂并专门设计用于预防并清除真菌感染。它由纳他霉素组成，纳他霉素是一种由纳塔氏链霉菌生产的多烯抗真菌抗生素。纳他霉素的抗真菌活性取决于它们与各种真菌的细胞膜甾醇的结合。

Funox®优势：

1、特异性强

Funox® 是一种用于培养基的添加剂，其中含有纳他霉素，纳他霉素是一种天然存在的抗菌剂，可保护细胞培养物免受各种常见真菌和酵母污染物的侵害。

2、应用范围广

Funox® 可用于长期用于细胞培养，也可用于预防新鲜制备的原代细胞培养物中的污染。

3、无细胞毒性

到目前为止，按照说明书使用该产品，尚未报告对各种细胞系的细胞毒性作用。

4、简单易用

Funox® 可以直接添加到细胞培养物的大多数烧瓶或板中，优选在更换培养基时或传代细胞后

5、稳定性

Funox®应在37°C孵育7天后换新，以达到最大的保护。

6、推荐用途

Funox® 适用于研究和工业中，用于细胞培养物和生物制品的直接测试。不建议用于临床诊断。需要注意的是，我们建议在污染晚期阶段的情况下丢弃细胞培养物。