双重PDGFRα/β阻断间质重编程，Zell Shield助力细胞培养

过量的间质和癌症相关成纤维细胞(CAF)促进癌症进展并促进免疫逃避。对基质操纵免疫微环境的机制的深入了解有助于改善癌症的治疗。

发表在《Cancer Research》上，标题为“Stromal Reprogramming through Dual PDGFRα/β Blockade Boosts the Efficacy of Anti-PD-1 Immunotherapy in Fibrotic Tumors"的研究，阐明基质重编程和改进癌症免疫治疗的潜在途径。血小板衍生生长因子C (PDGFC)和D的表达与胃癌患者的不良预后显著相关，PDGF受体β (PDGFRβ)在弥漫性胃癌间质中主要表达。经PDGFs刺激的CAFs显示CXCL1、CXCL3、CXCL5和CXCL8的表达显著增加，这些细胞参与多形核髓源性抑制细胞(PMN-MDSC)的募集。纤维化胃癌异种移植肿瘤表现为PMN-MDSC积累增加，淋巴细胞浸润减少，抗pd -1耐药。单细胞RNA测序和空间转录组学显示PDGFRα/β阻断通过基质修饰逆转免疫抑制微环境。最后，PDGFRα/β阻断联合抗pd -1治疗可协同抑制纤维化肿瘤的生长。这些发现强调了间质重编程对免疫再激活的影响，以及纤维化癌患者联合免疫治疗的潜力。

为了建立连续移植小鼠模型，科研人员将GAN-KP细胞皮下植入小鼠侧腹。肿瘤细胞接种3周后处死小鼠。将含有各种非癌成分(如成纤维细胞)的肿瘤块在1x TDR (BD Biosciences)中切碎并解离，在37°C下连续旋转30分钟。将样品悬浮于含有2% FBS和2 mmol/L EDTA的PBS缓冲液中，将细胞悬浮液应用于70 μm滤网。每个样品中含有的红细胞通过加入1ml VersaLyse (Beckman Coulter)溶解10分钟，然后在缓冲液中冷却。将微球镀在胶原包被培养皿(IWAKI)上，用含有10% FBS和Zell Shield (Minerva Biolabs)的RPMI1640培养。细胞培养1周后皮下植入小鼠侧腹。肿瘤细胞接种3周后处死小鼠。该过程作为连续移植方法重复进行。

Zell Shield可以预防细胞实验室的细胞支原体污染，方便高效。