Mynox®细胞支原体清除试剂

适用范围：

不易获得的生物样本，被支原体污染了，但需要挽救，不能丢弃， 例如：不容易获得的细胞种子。可采用支原体清除法。若是无法长期培养的珍贵样本或病毒收获液，则推荐使用德国MB公司的Mynox® ，处理3小时，直接杀除。Mynox 仅供研究使用。不适用于临床治疗。

使用方法：

1. 贴壁细胞系的处理

1.1细胞和除菌混合物的制备

1.1.1使用无菌的6厘米培养皿配制消菌液。

1.1.2加入2.8 ml含5% (v/v) FBS的标准细胞培养基。

1.1.3加入200µl Mynox®(1瓶)。

1.1.4在含有5% (v/v)FBS的细胞培养基中加入2ml新鲜胰蛋白酶化的10^4 – 10^5细胞。包括细胞在内的处理液的总体积为5ml。注意:确保只处理单个细胞(在显微镜下检查!)如有必要，增加胰蛋白酶处理的持续时间或通过上下移液机械分解细胞团块。注意:先加入Mynox®，然后将细胞放入培养基中。将细胞直接加入除菌混合物培养基中(将吸管头直接插入溶液中).

1.2 Mynox®的处理细胞

1.2.1在正常生长条件下，将细胞与除菌混合物保持一整个传代周期(约6至8天)。然后，除去含有Mynox®的培养基，将细胞在标准培养基中传代。

1.2.2.注意:如果细胞在8天后仍未达到融合，请停止处理，丢弃含有Mynox®的培养基，并添加新鲜的标准细胞培养基。注意:在处理过程中，应经常观察细胞，检查细胞毒性作用，如果明显注意到，应立即停止治疗，更换培养基或用培养基1:5稀释混合物。

2. 悬浮细胞系的处理

2.1细胞和除菌混合物的制备

2.1.1使用无菌离心管配制除菌混合物。

2.1.2加入1.6 ml 0.125%胰蛋白酶和5 mM EDTA。

2.1.3加入200µl Mynox®(1瓶)。

2.1.4将1.6 ml含有10% (v/v) FCS和10^4 – 10^5细胞的标准细胞培养基从悬浮细胞培养液中转移到除菌混合物中。漩涡。包括细胞在内的处理液的总体积为3.4 ml。注意:确保只处理单个细胞(在显微镜下检查!)注意:首先加入Mynox®，然后将细胞放入培养基中。将细胞直接加入溶液中(将吸管头直接插入消泡液中!)注意:在旋转过程中，请确溶液湿润离心机管的整个内表面。

2.2 Mynox®的处理和去除

2.2.1 37℃孵育30分钟。

2.2.2将细胞轻离心(600 × g) 5分钟，丢弃上清。

2.2.3将细胞重悬于不含Mynox®的标准细胞培养基中，置于培养瓶中。为了获得更有效的方法，可以在Mynox®存在下进行1代传代培养:

（1）将细胞重悬在含有5% (v/v) FBS和150µl Mynox®的5ml细胞培养基中。

（2）在正常生长条件下，将细胞在此培养基中培养3天。

（3）将细胞在无Mynox®生长培养基中传代。

（4）注意:在治疗过程中，应经常观察细胞，检查细胞毒性作用，如果明显注意到，应立即停止反应，更换培养基或用培养基1:5稀释混合物。

产品优势：

Mynox® 是一种支原体去除剂，不含抗生素的制剂，通过诱导微生物死亡来消除支原体污染。它的活性基于生物物理机制，因此几乎不会产生抗性菌株。

1.快速、有效。针对无法长期培养的珍贵样本，使用Mynox®处理细胞3小时左右，即可祛除支原体。

2.不含抗生素，不会诱导支原体耐药。