新研究报道：胚胎干细胞嵌合哺乳动物的活产，Ausbian胎牛血清助力科研

干细胞的培养需要胎牛血清提供营养成分。Ausbian进口胎牛血清，澳洲血源内毒素含量低，品质稳定。

哺乳动物囊胚内细胞群(inner cell mass, ICM)的瞬时多能状态，可以在体外，通过建立胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)或体细胞重编程为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)来获得。

通过这些方法可以产生可扩展的PSC系，根据培养条件的不同，来模拟不同的早期胚胎阶段。植入前的icm样PSCs通常被称为“naive"，而植入后的上皮细胞样PSCs被称为“primed"。 naive多能性的黄金标准是产生，具有同源psc来源细胞的高贡献的活嵌合动物，这种方法已经在小鼠和大鼠中得到了很好的建立。

从原始psc中产生高贡献的嵌合非人灵长类动物(NHPs)，将有力地证实在进化上与人类接近的物种中植入前的icm样多能性。

无论是通过早期胚胎注射CRISPR-Cas9试剂，还是通过培养成纤维细胞基因编辑结合体细胞核移植，对nhps进行复杂的基因修饰，其效率都受到限制。另一种方法是利用同源psc产生高贡献嵌合。然而，NHPs和其他哺乳动物的嵌合现象落后于啮齿动物。先前的研究表明，NHP与同源PSCs嵌合产生的流产胎儿或食蟹猴后代的嵌合组织供体细胞贡献较低(0.1-4.5%)。

通常认为，不能实现大量嵌合是由于供体细胞与宿主胚胎缺乏发育匹配，供体细胞在囊胚或组织壁龛中逐渐竞争性消除所致。

最近的研究表明，通过过度表达外源因子(如BCL2或BMI1)来操纵生存途径部分克服PSC凋亡并增强种间嵌合，具有诱导基因组异常的风险。因此，改进培养程序以达到更忠实的primed多能状态是一种合适的实验方法。目前有多种培养基可用于诱导人类naive多能干细胞，这些培养基在naive多能基因的表达水平和基因组稳定性方面存在差异目前已知，诱导primed多能基因高表达的配方显示出较低的全球dna甲基化水平，从而导致基因组不稳定和核型异常这种异常可能影响注射的psc的分化潜能。值得注意的是，最近报道的4CL培养基能够产生具有高表达水平的primed多能基因的人类原始psc，并且在长时间培养中没有可检测到的核型异常

近日，发表在《Cell》上的一篇研究，系统测试了多种人PSC培养基对食蟹猴ESCs的影响，并优化了早期猴胚胎的注射方案和注射胚胎的体外培养。

文章标题为：“Live birth of chimeric monkey with high contribution from embryonic stem cells"。

科研人员发现，4CL可使猴供体PSCs在同源囊胚内的存活改善猴初始多能状态，并且建立了一个完整的组织表征管道，包括GFP+细胞计数，线粒体和基因组DNA的单核苷酸多态性(SNP)分析，以及单细胞转录组分析。使用这些方法，研究人员证明了猴ESCs在体外长时间胚胎培养和体内妊娠期间的高度嵌合，产生的后代在嵌合组织(包括性腺和胎盘)中显示了20-90%的供体ESCs。该结果代表了一个原则性的证明，即通过与同源的原始PSCs的早期胚胎互补，可以在NHPs中产生具有高ESC贡献的嵌合体，为未来一代基因编辑的PSCs的转基因NHPs铺平了道路。