真菌是一类具真核和细胞壁的异养生物。真菌可以通过孢子延续种群,典型的营养体为丝状分支结构。可污染细胞培养基的真菌种类繁多,最常见的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。
与其他类型的污染相比,真菌污染的症状明显不同且更易观察。
在培养基中会形成淡黄色或白色的漂浮物,肉眼可见,较易被发现;
短期内培养液多不变混浊;
显微镜下可以看见细胞之间或是培养基中,有纵横交错穿行的丝状,树枝状或管状菌丝;
多数菌丝在高倍镜下可以观察到链状排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圆形,散落在细胞上及细胞周边生长。
真菌污染的鉴定,需要将待检测的细胞培养基,接种在真菌专用培养基上进行鉴定,例如:马丁培养基、沙氏培养基等。
与处理细菌污染的原则一致,细胞培养物一旦发生真菌污染,建议舍弃培养物。应尽快把污染细胞与其它细胞系隔离开,不要打开培养皿,以免孢子飞出;同时需要对实验过程中所用的器材、试剂和操作空间做相应处理:消毒液喷洒、紫外线消毒、高温灭菌等。
如果细胞不能被丢弃,需要进行除真菌处理,请注意:高浓度的抗生素或是抗菌素(两性霉素 B 、泰乐菌素等)对细胞会产生一定毒性,在使用前可以进行剂量反应实验确定影响。
因此,发生真菌污染,尽量丢弃培养环境中的全部细胞。