细胞细菌污染症状及处理方法

 细菌污染是生物实验室，在培养细胞的过程，常见的问题之一，会直接引起细胞死亡，影响实验进度。本期内容，我们汇总了细菌污染的症状，并分别给出了应对方法。

细菌是一种原核细胞微生物，一般为微米级别。细胞培养过程中常见的污染菌为大肠杆菌、葡萄球菌、假单胞菌等。

细胞发生细菌污染后，有哪些症状？与其他污染相比，细菌污染在细胞培养过程中“发病"更为迅速，较容易被发现。具体表现为：
细胞培养液短期内变黄且浑浊（大量酸性物质累积）；
静置的培养液时不浑浊，但稍加震荡，就有许多浑浊物漂起；
可见培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮；
细胞停止生长并有中毒表现，后出现大量死亡；

如何用实验来验证，细胞是否被细菌污染？常见的染色法、培养法以及PCR方法都可以对细菌污染进行检测。
如果只需要初步判定细胞是否被污染，课选择涂片染色或培养法对样品进行检测。
例如：革兰氏染色法会使阳性菌呈现紫色，阴性菌呈现红色；向肉汤培养基内滴入少量培养液，37 ℃培养，培养基变浑浊；专业的PCR检测：以Minerva Biolabs公司的细菌PCR检测试剂盒（Onar® Bacteria Detection Kit，货号：12-1025）为例：
该试剂盒采用PCR方法，用于检测生物样品（包括细胞培养物和病毒贮存液）中是否存在细菌。根据序列分析，该试剂盒可检测超过45种细菌属，其中含污染细胞的常见菌属：


如果细胞不幸遭遇到了细菌污染的侵袭，该如何应对呢？对于常规细胞培养物而言，发生细菌污染，建议直接将培养物丢弃，并对环境进行消杀，紫外线灭菌、消毒液擦拭培养箱、工作台等。
对于重要且污染相对较轻的细胞：一般用抗生素的常用量的 5-10 倍作冲击疗法，用药 24-48 小时后再换常规培养液，但需要需要注意的是：一旦发生污染后再使用抗生素常常难以清除干净，有的抗生素只有抑菌作用而无杀菌效应。且有研究表明，大量使用抗生素，或对细胞基因组产生影响，该种处理方法属于“杀敌一千，自损八百"，因此不做推荐。

因此，防范大于治疗，在细胞实验过程中，我们不希望看到任何微生物污染的情况发生。为了避免浪费有限的精力和经费，应优先预防污染的发生。实验前穿戴好防护用具，既是保护自己，也是保护实验材料；定期对实验环境进行清洁消毒，也能有效预防微生物污染的发生。

使用专业的支原体祛除试剂，更加高效、安全和便捷。实验空间中的墙壁、实验台、桌椅板凳、显微镜、冰箱、离心机等设备和仪器，可使用Mycoplasma-off™或Mycoplasma-off™ Wipes对其进行喷涂或擦拭，清除表面的多种微生物污染。对于水浴锅、培养箱水槽等环境，可以选择Water Shield™对其进行处理。讲产品按比例直接加入水浴锅或培养箱水槽中，可预防微生物污染。