胎牛血清是细胞培养液中,一种重要的添加成分,中含有诸多细胞生长因子,维生素,氨基酸等物质,在细胞贴壁、生长、繁殖过程中,发挥着重要作用。
我们常会看到,胎牛血清的标注上,有对产品灭活也有没有灭活的。在我们的常规细胞实验中,胎牛血清究竟要不要灭活?本期内容将做详细解答。
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血清的灭活指的是什么?
一般情况下,血清的灭活是在血清解冻后进行的,通过水浴加热的方式来处理,温度和时间控制在56℃加热30分钟或40℃加热20分钟。
02
为什么有的血清需要热灭活?
很多人会认为,血清的热灭活是为了杀灭血清中的细菌和病毒等微生物,其实不然。正规且合格的血清,会严格监控血清中的微生物指标,理论上,用户买到手的血清,都是无菌的、解冻后可直接使用的。
热灭活显然不是针对病原微生物,而是为了灭活血清中的补体。
补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,可组成庞大的补体系统,可介导免疫应答和炎症反应。激活的补体参与溶解细胞过程,刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此,如果你的实验涉及以下这些情况时,建议去除血清可能带来的补体系统的干扰。
1、免疫学研究
2、诱导胚胎干细胞分化
3、利用昆虫细胞研究病毒感染
4、培养平滑肌细胞
5、其他补体参与的细胞培养过程
因此,当涉及到一些对补体比较敏感实验、且血清中补体浓度相对比较高,可能存在对实验的影响时,需要考虑对血清进行热灭活。
03
胎牛血清是否需要热灭活?
正规的胎牛血清,要求对5-8月胎龄(一般牛在10个月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心脏穿刺的方法采血,随后进行其他制备步骤,得到胎牛血清。因此:
靠谱的胎牛血清,没有形成一个完整的补体系统,不会真正地干预免疫!
血清的最佳工作温度一般是在37℃左右,所以热灭火对于血清而言,也是一种不小的伤害,会导致一些营养成分流失,进而影响细胞状态。所以常规实验中,选择合规的胎牛血清,无需对血清进行热灭活。
如果实验中涉及到一些其他特殊的“神秘活性物质",必须要灭活,根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够尽可能多地保留营养成分。
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胎牛血清常规使用过程中,无需热灭活的前提是,胎牛血清的采血时间严格控制在5-8月龄、生产流程、包装运输等过程符合规范要求。因此,选择一款合格的胎牛血清,对于实验而言是十分重要的。
Ausbian进口特级胎牛血清,澳洲血源,将经过初步检测合格的很多供体胎牛的粗血清,混合在一起,在低温条件下,经七次加压过滤,最后三次为0.1 µm无菌过滤处理,得到胎牛血清。
同一批次血清质量上基本无差异。不同厂家一个批次产量差异较大,从100升到2000升不等。批次大,更利于试验的稳定和连续的可参照性。
所有血清出厂前,均经过严格质控,每个批次附有详细完整的《检测报告》。
Ausbian进口特级胎牛血清的优势:
1>精选内毒素更低批次(≤3EU/ml)澳洲血源。是细胞典藏等重大项目十几年的稳定供应品牌。
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7>为Ausbian®血清提供免费代储存服务,为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护,按要求随时发货。
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