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警惕!细胞培养中的支原体污染!

更新时间:2023-03-11  |  点击率:541

细胞培养技术,对于实验环境的洁净度有严格的要求。不仅要对细胞实验用的基础设施进行维护,还要定期对环境进行清洁,防止细胞被真菌、细菌、支原体等微生物污染。


我们反复强调要避免细胞的支原体污染。那么,支原体对于细胞培养而言,究竟有何种危害?本期内容,为大家介绍支原体污染的危害。

支原体发现于1898年。自1956年Robinson从细胞培养物中分离出支原体后, 国内外关于支原体污染细胞的报道便层出不穷。支原体广泛存在于自然界中, 有80余种。


支原体 (Mycoplamsa) 又称霉形体,归属于柔膜体纲 (Mollicutes) ,共有6个属,120个种别。支原体没有细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性。


对支原体进行革兰染色为阴性。不仅如此,支原体对青霉素这类干扰细胞壁合成的抗生素,具有天然抗性。


支原体通常附着在细胞的表面, 并影响其宿主细胞的生理、遗传等多方面的正常功能, 用这些污染后貌似正常的细胞做试验或生产, 将会严重影响结果。


1、影响细胞的生长繁殖及形态


细胞培养物遭受到支原体污染后,会出现生长减慢,细胞病变等情况。


具体表现为以下几点:


不仅如此,某些支原体还可在侵入细胞8小时内,使线粒体膨胀,继而被破坏,细胞核呈空泡化,细胞微管解聚,培养瓶中细胞与细胞间隙出现膜状沉积,细胞无法传代,甚至整个细胞群体溶解。

2、代谢和功能


支原体污染细胞的情况,在形态上变化不明显。但需要注意的是,细胞培养基的pH值,会有比较大的变化。更换培养液后几小时就变酸,培养基中的必需氨基酸被消耗掉,进而改变细胞代谢。


支原体对细胞代谢和功能的影响,具体体现在以下几个方面:


有研究表明,在单克隆抗体制备中,骨髓瘤或杂交瘤细胞因支原体的污染而导致融合失败或抗体分泌能力下降以至丧失。


3

引起染色体异常


改变染色体组型,通常可导致细胞染色体断裂、数目减少,出现双着丝点染色体、环状染色体等。


4、影响免疫细胞产量


对于巨噬细胞的培养体系,支原体会抑制干扰素的合成和降低其活性,加大了继发感染其他细菌和病毒的几率。也有研究表明,支原体可以通过植物血凝素,干扰淋巴细胞的刺激和分化。


为了尽可能降低细胞污染支原体的风险,应定期对实验环境进行清洁。


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