与传统的细胞培养不同,三维(3D)细胞培养,可以更好地重现细胞在体内的状态。该方法正逐渐成为细胞培养领域的一大热门。
3D培养种类众多,从原理上可以大致分为以下三类:
一、3D水凝胶培养
交联的多聚链,或复杂的天然或合成蛋白分子组成的网络构成的水凝胶,具有与天然组织相似的生物物理学特性,因此,可以作为3D细胞培养的基质。该材料可以单独作为基质使用,也可以与其他材料联合使用。常见的3D水凝胶培养材料有有ECM凝胶、胞外基质等。
该方法优势在于以下几点:
1.应用历程久,支持文献较多;
2.提供天然生物配体;
3.通常含有生长因子和细胞因子。
二、细胞聚集
细胞聚集是指几个细胞聚集在一起形成菌团的现象。悬滴培养板与低粘附平面等材料都能使细胞有很好的聚集效果。
该方法的优势在于以下几点:
1.有各种各样的相关器材可供挑选
2.细胞成球的大小相对更好控制
三、培养支架
培养支架是一种提供物理支撑的培养手段,细胞可以进入支架间隙生长并行使功能。培养支架大致可分为两大类:
天然支架(如胶原、明胶、纤维蛋白、几丁聚糖等),生物兼容性,但稳定性较差。
合成支架(如聚苯乙烯、聚己内酯、聚氨酯等),具有一致性、稳定性比较好,生物兼容性较差。
该方式的优势在于以下几点:
1.一致性或生物兼容性都能够照顾到;
2.与现有的生物培养器皿以及下游分析方法都有比较好的兼容。
无论是普通的细胞培养还是3D培养,都需要合适的细胞培养体系,来给细胞提供营养与生长环境。胎牛血清作为一种重要的添加成分,其品质的优劣,在一定程度上决定了细胞实验结果是否理想。
Ausbian进口特级胎牛血清,采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育好后这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。
出厂前均应经过严格质控,并附详细《检测报告》,如pH值、渗透压、内毒素、病毒检测、促细胞生长能力、无菌等检查。其中,由于内毒素直接参与细胞凋亡,对细胞培养结果影响较大,且不同批次的血清,内毒素差异又不易控制。
Ausbian血清从出厂,到实验室,全程低温冷链保护,尽可能避免血清反复冻融。