我们该如何应对支原体污染！

支原体是细胞培养中常见的，干扰实验结果的一种污染，但由于不容易被察觉，有些污染的细胞仍在继续使用。对于细胞培养实验室，支原体对细胞的污染风险不容忽视，这不仅因为常规的抗生素对支原体无效，而且因为污染早期也没有显著表现。一旦发生污染，支原体会影响细胞基因表达和营养代谢改变，严重干扰实验结果（包括细胞转染和病毒包被）。

一般来说，出现污染的细胞应进行丢弃，因为它们可能成为实验室内支原体污染的源头，造成污染的扩散。但对于费力扩增的细胞（如已转染，或经过体外刺激），有些人不愿意丢弃，因此，在细胞培养过程中，定期监测是否存在支原体污染，及时预防支原体污染是每个科研人员的工作之一。下面笔者给您推荐几个支原体防控的产品，仅供参考。这些都是德国Minerva Biolabs公司出品，在国际期刊上也具有很高的引用率。

一、环境中的支原体污染的预防和清除

Mycoplasma Off是一款支原体喷雾剂，用于清除工作区域中的支原体。它起效快（10秒钟即起效），安全无毒，对细胞不会产生不良影响，喷洒后，可再用干净纸张擦拭即可。对于工作台以及各种细胞操作的器具表面，均可使用。如果是需要避免沾染液体的电子设备，可使用Mycoplasma Off湿巾擦拭。

二、细胞培养中支原体污染的祛除

通常来说，被污染的细胞应该丢弃，以避免成为污染源。但对于珍贵的细胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox®或Mynox Gold®。以往别的品牌的支原体清除剂，其实只是抑制剂，它们抑制支原体的DNA合成和蛋白合成，但无法杀除。Mynox®是市面上一款具有杀灭作用的清除剂。它提取自枯草杆菌，可与支原体膜特异性结合，破坏膜通透性，导致支原体膨胀破裂而死。使用Mynox®一般在2-3个小时即可完成清除任务。

Mynox Gold®是Mynox®的升级版，它通过四个疗程产生作用。每个疗程即细胞传一代。它除了包括Mynox®，也包含复合抗生素成分。以往别的品牌的支原体清除剂只是针对支原体的抗生素成分，但也容易产生耐药。Mynox Gold®将Mynox®和抗生素结合，即结合了二者的优点，又去除了二者的不足，因为有的细胞对Mynox®的治疗不太适应，而Mynox Gold®要比Mynox®更加温和，对细胞的毒性效应极小，因而更适用于脆弱的不太好养的细胞。

三、细胞培养中支原体污染的监测

可使用MB公司出品的Venor® Gem系列，常用的是一步法试剂盒（Venor® Gem OneStep），它采用灵敏的PCR方法，能识别常见的至少二十七种支原体。所有试剂均在一管内，为稳定的冻干粉形式，用缓冲液溶解后可直接使用。细胞上清取2l即可完成支原体的筛查。

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