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在进行细胞实验的过程中，相信大家都有这样的经历：实验规划恨不得精细到每小时，甚至连哪天出数据都预估好了。
But......
理想很丰满，现实往往很骨感！
“隔壁王师兄的细胞都能传代了，我的这细胞，咋长得这么慢呢？"
所以今天，我们就来聊聊，细胞生长缓慢（异常情况的慢，一些特殊细胞不在讨论范围内）的可能原因。
原因很复杂，可以总结为以下几点，如果小伙伴们有更多观点，欢迎补充
细胞可能存在污染
各类细胞污染
都有可能导致细胞生长缓慢
如果培养体系，不小心被细菌、真菌、支原体污染，都会导致细胞因缺乏营养而出现生长缓慢的现象。
细菌污染发展迅速，一般会出现培养基浑浊、变黄的现象；真菌污染**辨认，显微镜下可见丝状菌体（有些甚至严重到肉眼可见）；而支原体污染往往防不胜防，显微镜下也很难捕捉到它的身影。支原体污染的典型特征是培养基提前变黄、细胞生长受阻，后期细胞大量死亡等。
因此，如果细胞生长缓慢，首先要考虑细胞是否存在污染。并做相应的处理。具体处理方法见以下几篇文章：
细胞培养中的污染监控与检测——细菌
细胞培养中的污染监控与检测——真菌
细胞培养中的污染监控与检测——支原体
培养体系有瑕疵
没有根据细胞特性调整培养体系
细胞的体外培养，依赖于完quan培养基的支持与保护。有些小伙伴拿到一株陌生的细胞，没有将培养体系研究清楚就开始实验，由于培养环境的改变，导致细胞一时无法适应，而出现生长受阻甚至停滞的状态。
当我们排除了细胞污染的情况后，就要考虑培养体系是否合理了：培养基种类、品牌是否进行过更换？血清类型是否用错等等，尽可能保证与原培养条件一致，如果要更换，也要循序渐进。
细胞初始状态较差
细胞长得慢
很可能不是你的锅
可能最一开始复苏的细胞，就被污染/活力不足。因此，建议大家再复苏一管同种细胞（**不是同批次冻存的），与现有细胞进行比较，观察长势。
公共设备可能存在问题
仪器的参数
也会影响细胞状态
如果细胞不存在污染，培养体系没有瑕疵、细胞初始状态也没有问题，那么可以考虑公共仪器设备是否存在纰漏。
最常见有水浴锅温度、室内温度及湿度、培养箱参数、水浴锅温度等。
水浴锅是细胞培养室常用的仪器，要定期用温度计对其工作温度进行检查，观察是否存在温度不准、温度骤变的情况。另外要强调一点，水浴锅也是常见的污染源之一，水浴锅中的水**使用无菌水，并定期做好清洁工作，推荐大家使用MB WaterShield，可以有效清除、预防水槽中的支原体，方便安全、省时省力省心。
细胞实验室的温度及湿度：仪器还是操作对温度没有特殊要求，维持舒适的温度即可，比如18~26℃；过高的湿度会导致微生物的滋生，所以建议正常维持湿度在70%以下。应定期用温度湿度测试仪对细胞实验室进行检测，以防温控系统出现故障。
培养箱参数：一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃；大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。但在实际操作过程中，细胞培养箱有可能会出现以下故障，影响细胞培养体系，进而使细胞生长变得缓慢：
温度和温度设定不准；
细胞培养箱湿度不能维持；
细胞培养箱的二氧化碳浓度不准。
对应解决方法给大家整理好，建议大家保存，以备不时之需。
实验人员可能发生变化
细胞“饲养员"的更换
也可能影响细胞生长速率
作为一名合格的细胞“饲养员"，一定要预先了解所养细胞的“习性"：用哪种培养法、使用何种类型培养体系（血清种类、基础培养基类型、是否添加生长因子以及抗生素等），尽可能还原初始的培养环境，让细胞有个适应的过程。另外，实验者自身也要注意操作规范，按照标准流程培养。
实验试剂可能发生改变
培养用的试剂
也可能会是影响因素
不同品牌的试剂可能会有些许差别，对于一些比较娇贵的的细胞，这些细微的差别很可能会导致细胞生长受到影响。因此我们一直强调大家“追本溯源"，尽可能用与原来一致的培养条件。
如果要更换试剂，建议大家先做个对照试验，看看新的试剂对细胞生长有没有影响。
另外，除了以上这六点，还有一点需要特别注意，就是：
细胞的代次
一般来说，细胞传代次数是一定的（一些癌细胞系属于特例），特别是像间充质干细胞这类对代次比较敏感的细胞，需要格外注意，传代次数过高后（10-15代左右），细胞生长速率也会明显减慢。在实验时，尽量选择代次较低且状态稳定的细胞。
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