高效复苏细胞有没有什么秘诀？

细胞培养的开始，就是复苏细胞。如何有条不紊地让细胞从沉睡中苏醒？今天就来给大家总结几个实用小技巧，快点来get！

细胞复苏流程：

1、将冻存的细胞从液氮罐中取出，立即放入37°C的水浴中进行融化，轻柔晃动，加速融化，直到小瓶中只剩下一小块冰，时长应控制在1min中；

2、用70%乙醇擦拭瓶外后转移无菌操作台中，打开瓶盖前，用酒精灯火焰对瓶口进行消毒；

3、将预加热的新鲜完quan培养基滴入小瓶中。缓慢用移液枪吸取瓶中液体至15ml离心管中，加入适量浓度和体积的完quan培养基，轻柔混合均匀；

4、200 × g左右细胞悬浮液离心5-10分钟。实际的离心速度和持续时间因细胞类型而异。弃掉上清，加入新鲜完quan培养基重悬细胞，并将其转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中。

细胞解冻流程图

注意事项：

1、液氮温度低，小心低温对人造成的伤害，在液相中储存的冷冻瓶在解冻时存在爆炸的风险，因此，取出冻存管的时候，要做好个人防护。

2、通常细胞集中储藏在液氮中，取出时应迅速，避免温差对其他冻存细胞造成影响。

3、复苏细胞的核心技术，简而言之就是快融，将在37°C水浴中快速解冻冷冻细胞(< 1分钟）。

4、解冻时，冻存管先放入无菌一次性PE手套中，再放入水中融化，避免污染也方便操作。

5、用预热过的培养基慢慢稀释解冻的细胞。

6、解冻细胞后，在培养皿中培养时，应尽量维持高密度，以提高细胞存活率。

7、注意无菌操作，避免细胞发生污染。

细胞高效解冻的另一个成功秘诀，就是选择一款优质血清！

Ausbian进口特级胎牛血清，有以下优点，可以尽可能帮助实验者提高细胞实验成功率：

1. 精选内毒素更低批次（≤3EU/ml）。是细胞典藏等重大项目十几年的稳定供应品牌。

实验室有些细胞，需要长期培养、长期冻存，或者经常复苏、经常培养的，血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康，都应该选用更低内毒素的血清，以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。

2. 新批次在试用前，提供试用服务，养细胞更放心。

3. 每个批次产量800-2000升，试用满意的实验室批号优先锁定，保证大多数项目两年不需换批次，细胞试验数据稳定。

4. 每年按厂家生产顺序，会有多批次平行供应，每个实验室专属批号管理，保证供货稳定。

5. 为Ausbian血清用户免费提供申报支持，具有完整的检测报告，为各类项目的申报提供支持（同时为血清VIP用户在支原体检测、方法学验证等方面，提供更多免费延伸性技术帮助）。

6. 针对特殊科研项目，可提供3-5个平行批次，让试验人有更多选择空间。

7. 为Ausbian血清提供免费代储存服务，为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护，按要求随时发货。

8. Ausbian血清从出厂，到实验室，全程低温冷链保护，确保血清无反复冻融。

9. 免费真品保障，每个血清瓶身加贴Viansaga®易破损防伪标签，Ausbian品牌真品保护，逢假必究，为实验室做好售后保障。

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