血清使用小技巧 | 如何保证血清活性？解冻和储存方法很重要

刚到货的血清应该怎样储存？

血清到底要怎样解冻才能保证活性？

血清在4℃冰箱能放多久？

作为一名细胞培养大户，你是不是经常会纠结上面这些问题？毕竟血清这种金贵的东西，可得好好珍惜，一个不小心，就可能导致实验失败，免不了要被导师责备。

那这些问题到底应该怎样解决？有没有标准答案？身为一个资深的代理商，关于血清的储存和解冻问题我们可是有好好研究过的。

如果你也存在同样的疑惑，那就请接着往下看吧。

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常规储存

首先，刚到货的血清，趁着它还冻手，赶紧放进-20℃冰箱中，避免反复冻融。当然，如果你的课题组不差钱，-80℃冰箱空间充足，把血清储存进去也是没有问题的。

稳了

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如何解冻

很多同学会说，不就是解冻血清嘛，这题我会！

放4℃过夜

emmm……怎么说呢，直接在4℃冰箱里过夜融化的方法，虽然很多人在这么用，但还是有一些潜在的风险的。

我们都知道，在血清这种混合物中，融化速度：蛋白质等干物质>水这类溶剂，所以蛋白质会先溶解析出，而水还是结成冰的状态，导致瓶子中间会出现一根透明的冰柱，而周围则会呈现上黄下红的分层浑浊液的状态，在使用过程中很容易引起沉淀、混合不均匀、局部浓度过高等问题，影响细胞生长。

更重要的一点是，血清中珍贵的生长因子等活性物质，它们在解冻过程中，有着与细胞复苏类似的经历，都需要快速解冻才能尽可能保留生物活性。显然，4℃过夜这样的长时间处理，很有可能会导致一部分「营养成分」的损失，影响细胞生长。

所以，为了更好地保留血清中的活性成分，使细胞培养更稳定，我们推荐使用三步法溶解，具体方法见下表，有需要的同学可以截图保存。

如果是储存在-80℃的血清，则需提前几天先转移至-20℃冰箱中（至少24小时），再使用三步法溶解，避免温差过大使血清失活。

注：此方法国际通用，适用于所有培养基，在水浴过程中，血清的平面要浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身，使血清混匀，但摇动中尽量不要产生泡沫！

解冻血清后，可以根据实验需求，将其分装，保证每一份够一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后赶紧放回-20℃冰箱继续储存。需要配制培养基的时候，再从-20℃冰箱中取出一管来解冻使用（尽量能全部配成培养基，不要有剩余），可以有效避免反复冻融的问题（遵循现用现配、现配现解冻的原则）。配好的培养基可以放到4℃冰箱进行储存。

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4℃存放时间

看到这里，问题又来了，配好的培养基，或者剩下的那一点点血清，能在4℃冰箱里放多久呢？

先给出我们认为比较合理的答案，再来解释原因：

7天

一般情况下，已经解冻的血清，无论是配成完quan培养基还是在冰箱里备用，都不要超过一周（7天），原因也很简单，存放太久，生长因子等物质容易失活，而且比较容易受到污染，影响实验结果。

不知道今天这期内容有没有解决大家的疑惑，无论是国产还是进口血清，都不算便宜，这么贵巴巴的试剂，还请小心使用，物尽其用，可不能让银子白花！