当前位置:首页  >  技术文章  >  一文解析「细胞质空泡化」,这几个关键点需注意

一文解析「细胞质空泡化」,这几个关键点需注意

更新时间:2022-11-28  |  点击率:655

细胞空泡化也叫做细胞质空泡化,是2019年公布的感染病学名词。

具体表现为:变性细胞的胞质、胞核内出现大小不一的空泡(水泡),细胞呈蜂窝状或网状的现象。变性严重者,小水泡相互融合成大水泡,细胞核悬于中央,或被挤于一侧,细胞形体显著肿大,胞质空白,外形如气球状。

导致细胞质空泡化的潜在因素

有一部分细胞质空泡化可以是可逆的,这类型的空泡化一般存在于暴露在诱导剂的情况下。诱导剂引起细胞状态的改变或者细胞周期停滞,表现为细胞质空泡化。合理控制诱导剂使用范围,在脱离诱导剂后,细胞通常会回复正常表型。

也有一部分细胞质空泡化是不可逆的。这种情况下,一般会导致细胞死亡,许多外源化合物、细菌、病毒感染后均会出现不可逆的胞质空泡化。

因此,导致细胞质空泡化的常见因素,可以总结为以下几点(如有更多观点,欢迎评论区补充):

药物诱导

一些特定的诱导剂处理,是细胞质空泡化的原因,一般是需要观察细胞变化而对细胞进行的特殊处理。

细胞老化

原代细胞培养的过程中有时会出现此类情况。一些细胞处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。

对于永生化的细胞系进行反复传代,导致细胞严重老化,也会出现这一现象。

渗透压和pH值

在细胞培养过程中,如果培养基渗透压或pH发生比较大的改变,或培养基的初始pH值与细胞正常所需pH值差别巨大,也容易使细胞生长收到刺激,发生空泡化。

胰酶消化

胰酶消化时间过长,或是在吹打细胞时太过大力而产生太多气泡,都容易导致细胞状态受损,长期如此,可能引起细胞质空泡化。

细胞代谢

在细胞培养过程中,由于血清质量差或是浓度过低等情况下,可能导致细胞代谢出现问题,如内质网应激从而引起细胞质空泡化的现象。

细胞自噬

当细胞缺乏营养处于饥饿状态时,也容易因细胞自噬而产生空泡,形成自噬小体,但是自噬小体仅能在电镜下观察到,光学显微镜下是观察不到的。

细胞污染

支原体污染:支原体污染的初期,细胞是没有什么明显症状的,而且也无法通过光学显微镜观察到,只有在严重的时候会导致细胞状态变差,出现细胞空泡化的现象,细胞膜上也会出现小黑点附着,以及培养基变色速度加快这类症状。

病毒污染:一些文献上也有记录,观察到病毒污染也会导致细胞出现空泡化的情况。

细胞质空泡化怎么办?

由于导致细胞质空泡的原因众多,因此要仔细分析,寻找解决方案。

1)如果是因为细胞老化导致的,可以通过复苏代数靠前的细胞进行培养来解决细胞空泡问题。

2)调整培养基至合适的pH,再进行培养,来解决因pH差异大而导致的细胞空泡问题。

3)在传代时,选择科学的消化方法:合适的胰酶浓度、适当的消化市场,在操作时避免吹打太过用力出现太多气泡。

4)要保证细胞培养所需的营养充足,可以根据情况,适当增加血清浓度以及谷氨酰胺。

5)选择质量优质、渠道正规的胎牛血清,优质胎牛血清经过严格的质量检测,外源物质尽可能做到更低,减少对细胞的刺激;渠道正规的胎牛血清,全程冷链运输,避免反复冻融而带来的营养物质的损耗,细胞生长更安心。

Ausbian进口特级胎牛血清, 精选内毒素更低的批次(≤3EU/ml),微生物检测结果均为未检出,全程冷链运输,避免反复冻融。

6)在细胞培养时要严格进行无菌操作,操作时要规范,减少污染的可能性。对于实验环境与器械,可以用实验环境专用的污染清除试剂:Mycoplasma-off™、Water Shield™,有效预防实验环境中的支原体污染。


Baidu
map