在疫苗生产、生物制药和细胞培养试验中,支原体污染的预防和祛除,是保证生产质量和实验顺利的重要环节。
Minerva Biolabs
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德国MB
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众多的大型生物药厂以及数不过来的生物实验室,预防、检测,祛除支原体的产品,都更青睐MB公司的相关产品。
本期内容,我们将把MB品牌的『环境中支原体祛除、细胞中支原体检测与祛除』产品,简明扼要地介绍给大家,希望对疫苗生产、生物制药、细胞治疗、CAR-T等项目的质检质控,以及更多实验室的科研工作者,能有所帮助。
环境中
支原体祛除
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德国MB
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实验环境中,支原体的祛除方法有很多。
但实际操作过程中,还是使用支原体专用清除喷雾或湿巾,更加高效、安全和便捷。
德国MB公司的Mycoplasma-off™可以算是“业界顶流”,有以下几个特点:
(1)快速有效
喷雾剂中含有支原体专用杀除剂Mynox®,可在几分钟内迅速杀除支原体。
(2)广谱抗菌
不仅能祛除支原体,而且能有效祛除葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、牛腹泻病毒、腺病毒、多瘤病毒、鼠诺如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。
(3)无腐蚀性和致癌性
乙醇作为溶剂,无腐蚀性和致癌性成分
(4)操作简便
即用型消毒液,可以快速简单地保持工作区的清洁干净。喷雾剂喷洒待消毒的表面,等待5-10min后,用干净纸巾擦拭。无菌通风2-3分钟。
对于水浴锅、培养箱水槽等环境,可以选择Water Shield™对其进行处理。与其他抑菌类产品相比,有以下几个优点:
长效:Water ShieldTM含表面活性剂、季铵盐和络合剂,不易挥发,可持续作用4周。
安全:不含醛类或叠氮化物,对细胞无毒害。
广谱:预防支原体、细菌、真菌、霉菌、孢子污染。
方便:Water ShieldTM按1:200比例,直接加入水中,使用方便。
不产生水垢。
细胞中
支原体检测
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德国MB
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要想准确判断细胞是否被支原体污染,光靠观察法是远远不够的,灵敏度更高、特异性更强、耗时短、操作便捷的PCR法则是更好的选择。其中,qPCR和常规PCR分别有其不同的适用场景及特点。
qPCR检测
更适合疫苗等工业生产用户使用,主要用到Venor®Gem qEP支原体检测试剂盒。该检测试剂盒有以下几个特点:
1、遵循欧洲药典和日本药典操作流。
2、高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。
3、高灵敏度,zui低检测限可达到≤10CFU/ml。
4、相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。
5、有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。
常规PCR检测
如果仅是实验室日常科研过程中使用,无需对支原体进行定量检测,则可以选择Venor® Gem Classic支原体常规PCR检测试剂盒。
该试剂盒高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单,易于观察。且覆盖面广,欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体,与细胞和真核DNA无交叉反应。
细胞中
支原体祛除
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德国MB
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一般情况下,细胞感染支原体,我们建议直接丢弃并对环境进行消毒处理,但总有一些特殊情况,导致我们愿意丢弃辛苦培养的细胞,这时就可以派细胞用支原体祛除试剂上场了。
Mynox®
对于无法长期培养的珍贵样本或病毒收获液,则推荐使用德国MB公司的Mynox® 。含有「治疗液」和「巩固防护液」。
「治疗液」来自枯草杆菌提取物,可特异性地与支原体膜结合,改变支原体膜通透性,从而使支原体在2-3小时内破溃死亡。
「巩固防护液」加入培养基,后续培养一个月,细胞将会清除支原体的污染,确切有效。
Mynox® Gold
若是可以培养超过一个月的细胞,则推荐使用德国MB公司的Mynox® Gold,直接杀除+巩固防护两步处理,祛除支原体的同时,可进一步在后续培养中巩固清除效果,防止支原体“卷土重来”。
Zell Shield®
适合细胞已发生支原体污染,但又不愿丢弃,希望继续培养:如已转染或大量扩增的细胞的情况。复合抗生素成分,抑制支原体蛋白和DNA合成,也抑制细菌和真菌。
先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞,再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞,能达到更好的祛除支原体的效果。