「细胞质控」助力高质量细胞培养

人有生老病死，细胞也是如此。在细胞体外培养过程中，细胞的活力和状态是处于一种动态变化的状态。

脱离机体保护的细胞，往往是很脆弱的，在体外环境中生长，培养条件的轻微改变，或许就会令细胞发生不可预估的变化。就比如，常见的原代细胞培养过程中，即使保持培养条件并未发生改变，但在传代过程中，细胞质量也经常是呈下降趋势的。

细胞质量改变，势必会影响实验结果。因此，对细胞质量进行适当的监控，有助于掌握细胞状态，对其能否进行后续实验做出合理的预判。

细胞质控

传统的细胞培养，主要是通过在显微镜下，观察细胞的形态学变化，以及传代培养周期的变化，来判断细胞状态。这种判断方法虽然便捷，但是由于比较主观，误差较大，也无法量化，或是进行统计学分析。

体外细胞的有效培养新概念——“细胞质控"。

可以通过细胞活力、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖及DNA损伤等五方面对细胞生长生存状态进行全面的监控。

在体外细胞培养的过程中，细胞总有一些因各种原因而死亡，总细胞中活细胞所占的百分比，即是我们常说的细胞活力。

是“细胞质控"中比较基础的指标。常见的流式细胞设备及部分细胞计数仪器都可以对细胞进行计数，也可以提供准确客观的细胞活力数据，为“细胞质控"提供准确、客观的统计学依据。

细胞活力检测注意事项

检测细胞活力时，需保证正常细胞的细胞膜是完整的。

核酸染料，如PI（Propidium iodide，碘化丙啶）常用于流式细胞仪分析。细胞在处于坏死或即将死亡的细胞细胞膜常处于受损状态，由于PI不能通过正常完整的细胞膜，因此，细胞活力不佳的细胞，PI可将其染成红色，用于分辨坏死细胞/正常细胞。

如果染色时再加入另一种能够通过细胞膜的核酸染料，就可以将活细胞和死细胞区分开。

例如，PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用，区别活力不同细胞。

细胞活力检测的其他应用

除了对细胞进行常规的质量检测，细胞活力测定还有其他更广泛的应用。

例如，细胞活力是细胞毒性实验的指标之一。判断某种外源成分（化合物、小分子药物或蛋白质等）对细胞是否存在毒性或毒性的高低，首先要观察的，就是该成份是否会诱导细胞死亡，也就是细胞活力的变化。

另外，除了细胞毒性研究，细胞质控在病毒感染或者RNA转染的研究中发挥着重要作用。转染/感染所用的试剂，或多或少会对细胞产生一定的负面影响。因此，在转染之前，活细胞需要达到一定的比例才可以保证在转染实验的顺利进行。

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• 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调节它们所结合的物质活力。

• 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

• 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

• 起酸碱度缓冲液作用。

• 提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

• 参与细胞冻存。

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