今天我们来聊聊,如何祛除珍贵细胞/生物样本中的支原体污染。
1.珍贵细胞/生物样品支原体祛除
适用范围
不易获得的生物样本或珍贵的细胞,被支原体污染了,但需要挽救,不能丢弃, 例如:珍XI的细胞种子。可采用Mynox®或Mynox® Gold。
若是无法长期培养的珍贵样本或病毒收货液,则推荐使用德国MB公司的Mynox® ,处理3小时,直接杀除。
若是可以培养超过一个月的细胞,则推荐使用德国MB公司的Mynox® Gold,直接杀除+巩固防护两步处理。
2.产品特点
Mynox® 特点
(1)快速、有效。针对无法长期培养的珍贵样本,使用Mynox®处理细胞3小时左右,即可祛除支原体。
(2)不含抗生素,不会诱导支原体耐药。
注意:Mynox® 处理后的细胞由于支原体破溃,此时做支原体PCR检测,会呈强阳性。建议传代3-4次以后,再做PCR检测,此时会呈阴性。
Mynox® Gold特点
(1)治疗液Mynox+巩固液的设计,祛除支原体的同时,可进一步在后续培养中巩固清除效果,防止支原体“卷土重来"。
(2)不含抗生素,不会诱导支原体耐药。
3.使用方法
Mynox® 使用方法
(1)细胞重新传代时,用含Mynox®、5%FBS的的培养基替换原有培养基,对细胞进行培养。
(2)孵育培养2-3小时。
(3)对细胞进行换液。
(4)用不含Mynox®的正常培养基(原始培养条件)对细胞进行培养,传代3-4次。
(5)对细胞进行支原体检测。
Mynox® Gold使用方法
(1)治疗液与含5%FBS的培养及混合。
(2)将混合后的治疗液添加至培养皿中。
(3)将接种细胞。
(4)培养细胞至80%-90%汇合后,进行传代。
(5)传代的同时加入巩固液
重复(4)(5)两次
(6)再无Mynox® Gold的情况下传代
(7)用Venor® Gem支原体检测试剂盒检测