细胞培养相关从业人员,或多或少都会接触到动物血清。在使用过程中,也有不少小伙伴们反馈,血清会出现少许或大量白色絮状沉淀。这种情况下,血清的品质是否会受到影响?血清还能否正常使用?
血清沉淀的来源
一般情况下,白色絮状物为纤维蛋白和脂蛋白,由于生产工艺、血源、储存环境等不同因素,血清会出现某些蛋白物质浓度过高而析出,产生絮状沉淀物的现象,属于正常血清特性不会影响其品质。
但也有还有一种情况:
注意!
血清解冻后无明显沉淀,但使用一段时间后,出现了大量沉淀。
这时就要提高警惕了。很有可能是血清出现了污染,需要仔细判断。多数情况下就不建议再使用了。
血清沉淀的影响
那么问题来了,既然正常的絮状沉淀不影响血清品质,那为什么我们还要反复强调要用科学的使用方法来尽量减少沉淀呢?
一个主要原因就是:
血清沉淀会在视觉上对实验造成一定的影响。
大量的沉淀很容易遮挡视线,影响对培养基状态的观察;而微量沉淀又容易与细胞污染混淆,影响实验人员的判断。
所以我们建议,在使用过程中,尽可能减少因人为操作而引起的血清沉淀。
如何减少血清沉淀
首先就是保证血清在运输途中,全程冷链运输,减少因反复冻融而出现沉淀的现象。
其次,解冻血清时,建议采用三步法,解冻时,规则摇晃均匀,使温度及成分均一。
另外,不建议将血清置于37℃太久,否则血清易变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
最后,血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,则不建议进行热灭活。
如果血清中已经产生沉淀(非污染情况),该怎样去除?
只需离心血清:400g,1-2分钟,或简单让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里。
一般不推荐过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤