关于胎牛血清的争论
胎牛血清(FBS)长期以来一直是哺乳动物细胞培养补充剂的黄金标准,广泛应用于细胞生物学,而细胞生物则是疫苗、抗体、细胞信使RNA和各类细胞疗法的基础。
但有关胎牛血清的使用,一直都存在争议:
添加胎牛血清(FBS)用于生产细胞衍生药物产品的安全问题引发了人们对替代胎牛血清的呼吁。
有科研人员建议用合理的替代生长补充剂来生长人类细胞而不是FBS。人类血小板裂解物已经用于干细胞扩增,但如何最好地获取这些裂解物还存在问题;一些以血清为基础的胎牛血清替代品已经取得了一些良好的结果,但这些替代品仍然是以动物为基础的。
进一步的研究表明,虽然一些人类干细胞可以通过一些胎牛血清替代疗法在体外维持一段时间,但也有研究提到:与胎牛血清相比,血清替代法在支持多能干细胞扩增和分化方面的能力较弱。
那么,胎牛血清究竟能否被替代?
血清 VS 各类替代物
此前,有人对FBS的用以下四个替代品进行了比较:
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研究人员先用含有10%FBS的培养基中培养内皮细胞系(C2BBe1)和神经元细胞系(SH-SY5Y),在细胞接近汇合时,进行划痕实验,在接下来的25天内逐步将FBS替换为上述替代品。然后然后对细胞进行染色、计数并比较细胞活力、细胞迁移和以及立体生长情况。
那么实验结果是怎样的呢?
与含10%FBS相比,C2BBe1细胞系根本无法在10%替代物C中正常增殖,但在10%替代物B®或10%替代物D中却生长良好。
使用SH-SY5Y细胞,只有替代物B才能达到FBS的功效。SH-SY5Y细胞在这些替代物中的生长、增殖状况,均低于11种不同品牌的FBS(阳性对照)。
即便是由血小板衍生的替代物D在非FBS生长补剂中效果相对较好,似乎是好的,但也仅是使细胞增殖,而不能诱导细胞生长为立体的球状。与FBS相比,细胞的生长也仍然较慢。
总结
三类FBS替代品:
无血清和无异种物质,化学成分明确:替代物C;
人血小板裂解液:替代物D;
两种混合纯化生长因子的新生牛血清产品:替代物A、替代物B。
其中替代物C对实验所用到的细胞系的效果最差。替代物B和替代物D效果相对较好,至少与FBS培养条件下,内皮细胞系的性能接近(在细胞传代2周的情况下)。但这两种非FBS生长补充剂在第3周的第3次细胞传代时也出现了问题。
因此,该研究可看出,FBS目前还没有找到很好的替代品,大多数细胞生物研究的黄金标准营养添加物仍然是胎牛血清。
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