干细胞培养的发展历程

1981年Kaufman等人[1]直接从小鼠囊胚的ICM 中成功获得多潜能的胚胎干细胞（ES细胞）以来，自此之后，人们先后从猪、牛、兔等动物体内，分离得到ES细胞或类ES细胞系。

随后的研究中，Thomsom 等人[2]建立了人类胚胎细胞系，科学家们开始关注于胚胎细胞的定向诱导分化，希望通过这类研究为治疗退行性疾病提供组织、器GUAN移植的原材料。显然，干细胞的体外培养是进行上述各项研究的前提与基础。在干细胞的体外培养方面，培养基是其赖以生存的环境，哪怕是极微小的变化都会影响干细胞的增殖和分化[3]。

在随后的研究中，科研人员发现，干细胞具有两个特性：自我更新的能力以及多向分化的潜能。在体外培养时，实验人员需要尽可能利用各种培养条件，维持干细胞的这两大特性。因此要求ES细胞培养基中，除了一般体外培养所用到的基础培养基，还应添加血清、LIF、β-巯基乙醇，L-谷氨酰胺等成分，随后有发展出饲养层培养等方法，各种干细胞专用培养基、条件培养基也相继问世[4]，丰富了干细胞培养方法与流程。

但目前市场上，干细胞培养专用的试剂盒，其中培养基和细胞因子价格高昂，使得培养成本大大增加，而且实际操作过程往往需要配合饲养层来培养，周期长，步骤繁琐，对实验者有较高的技术要求，因此很多实验室培养干细胞的效果并不理想。

参考文献：

［1］ Evans M J，Kaufman M H．Establishment in culture of plurpotential cells from mouse embryos ［J］．Nature， 1981，292：154-156．

［2］ T homson J A，Itskovits-elder J S，Shapiro S S，et al． Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts［J］．Science，1998，282（5391） ：1145-1148．

［3］ 杨 奇．胚胎干细胞的分离克隆［J］．西北农林科技大 学学报（ 自然科学版） ，2001，29（3） ：120-124．

［4］ 郭志林，王新庄，卫 木，等．影响昆明小鼠和 BALB／c 小鼠胚胎干细胞分离、克隆、传代的若干因素［J］．中 国兽医学报，2006，26（4） ：448-450．