欧洲药典中，关于「支原体检测」的那些事

欧洲药典

&

支原体检测

检测限

特异性

耐用性

欧洲药典近二十年来，已先后出了好几版，早在2007年版就曾提到支原体的NAT法（即核酸扩增技术，如PCR，荧光定量PCR等）。

欧洲药典强调了对核酸检测方法的验证，包括检测限、特异性和耐用性。

一检测限

在检测限方面，欧洲药典指出，核酸扩增法如替代药典规定的培养法，其检测限需达到10CFU/ml，如替代指示细胞培养法（即DNA染色法），检测限需达到100CFU/ml。也可通过核酸拷贝数确定检测限，但应提前建立CFU与核酸拷贝数之间的换算关系。

二特异性

在特异性方面，欧洲药典规定了NAT法应能检测污染细胞的常见的9种支原体，包括：

莱氏无胆甾原体（A. laidlawii）

发酵支原体（M.fermentans）

猪鼻支原体（M. hyorhinis）

口腔支原体（M. oral）

精氨酸支原体（M. arginini）

肺炎支原体（M. pneumonia）

鸡毒支原体（M. gallisepticum）

滑液支原体（M. synoviae）

螺原体（Spiroplasma citri）

并且，NAT法应检查与细菌、哺乳动物DNA是否有交叉反应。

三耐用性

那么，进行方法验证还需要什么呢？

答案就是：标准品！

标准品好比一把尺子，能确定你所用的支原体PCR或qPCR检测试剂盒到底是否符合要求。

举个例子：可使用10CFU/管和100CFU/管的支原体标准品，支原体灵敏度套装囊括了以上提到的9种常见支原体，而且这些支原体都是冻干粉型灭活的，不会给实验室带来支原体污染，这一点也令人很放心。