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胎牛血清的相关知识你了解多少?

更新时间:2022-08-11  |  点击率:730

许多临床和做科研的小伙伴们都要涉及到细胞培养,在细胞培养实验中,血清无疑成为影响实验成功与否的重要因素,而在众多血清之中,牛血清是最为常用的。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,其中含有丰富的细胞生长所必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。牛血清是一种成分复杂的混合物,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。牛血清主要成分有蛋白质,多肽类,激素类,其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

牛血清根据取材时间不同而有不同的区分。

胎牛血清:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清

(1).特级胎牛血清:40纳米过滤,内毒素含量≤10EU, 血红蛋白含量≤10mg/dl。

(2).优等胎牛血清:经过3次100纳米过滤,内毒素含量≤25EU/ml,血红蛋白含量≤25mg/ml。

(3).标准胎牛血清:3次100纳米过滤,低内毒素, 低血红蛋白含量。

(4).活性碳/葡聚糖处理血清:激素含量大大降低。

(5).透析型胎牛血清:次huang嘌呤和胸腺核苷含量大大降低。

因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到最大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。

正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:

1. 正确储存,避免反复冻融

1) 血清在-20°C冻存。

2) 血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。

3) 血清和培养基应尽可能“现用现配",配好的培养液,应于一周内用完。

4) 血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。

2. 正确的融化

国际上流行的【血清融化三步法】可最大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。具体如下:

3. 关于胎牛血清的灭活

真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。

4. 胎牛血清的浓度

胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成*培养基。

曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体最佳浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。


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