“ 破解细胞生长慢，这几个关键点你注意了吗？（下）“

今天我们书接上回，接着讲讲另外3个关键点。

公共设备可能存在问题

仪器的参数

也会影响细胞状态

如果细胞不存在污染，培养体系没有瑕疵、细胞初始状态也没有问题，那么可以考虑公共仪器设备是否存在纰漏。

常见有水浴锅温度、室内温度及湿度、培养箱参数、水浴锅温度等。

水浴锅是细胞培养室常用的仪器，要定期用温度计对其工作温度进行检查，观察是否存在温度不准、温度骤变的情况。另外要强调一点，水浴锅也是常见的污染源之一，水浴锅中的水最好使用无菌水，并定期做好清洁工作，推荐大家使用MB WaterShield，可以有效清除、预防水槽中的支原体，方便安全、省时省力省心。

 

细胞实验室的温度及湿度：仪器还是操作对温度没有特殊要求，维持舒适的温度即可，比如18~26℃；过高的湿度会导致微生物的滋生，所以建议正常维持湿度在70%以下。应定期用温度湿度测试仪对细胞实验室进行检测，以防温控系统出现故障。

培养箱参数：一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃；大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。但在实际操作过程中，细胞培养箱有可能会出现以下故障，影响细胞培养体系，进而使细胞生长变得缓慢：

• 温度和温度设定不准；

• 细胞培养箱湿度不能维持；

• 细胞培养箱的二氧化碳浓度不准。

对应解决方法给大家整理好，建议大家保存，以备不时之需。

实验人员可能发生变化

细胞“饲养员”的更换

也可能影响细胞生长速率

作为一名合格的细胞“饲养员”，一定要预先了解所养细胞的“习性”：用哪种培养法、使用何种类型培养体系（血清种类、基础培养基类型、是否添加生长因子以及抗生素等），尽可能还原初始的培养环境，让细胞有个适应的过程。另外，实验者自身也要注意操作规范，按照标准流程培养。

实验试剂可能发生改变

培养用的试剂

也可能会是影响因素

不同品牌的试剂可能会有些许差别，对于一些比较娇贵的的细胞，这些细微的差别很可能会导致细胞生长受到影响。因此我们一直强调大家“追本溯源”，尽可能用与原来一致的培养条件。

如果要更换试剂，建议大家先做个对照试验，看看新的试剂对细胞生长有没有影响。

另外，除了以上这六点，还有一点需要特别注意，就是：

细胞的代次

一般来说，细胞传代次数是一定的（一些癌细胞系属于特例），特别是像间充质干细胞这类对代次比较敏感的细胞，需要格外注意，传代次数过高后（10-15代左右），细胞生长速率也会明显减慢。在实验时，尽量选择代次较低且状态稳定的细胞。