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动物源培养基Yes or Not?

更新时间:2022-07-29  |  点击率:812
多数情况下,动物细胞的体外培养均依赖动物血清而生长,脱离血清,细胞将无法生长。目前,使用较多的是各类牛血清,例如:胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清等,也有一些细胞培养会用到马血清。


但也有研究人员认为,细胞培养基中的牛血清,可能存在一定外源异种物质污染的风险,临床中使用的生物制品中如果有牛血清的残留,还有可能会引起过敏等反应。


于是无动物源成分培养基(Serum-Free Media)便应运而生。其中添加了血清中所含有的已知成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,还有一些蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物。能在一定程度上模拟血清的功能,帮助细胞生长。但无血清培养基中所能添加的因子有限,不能100%还原血清成分,因此对于细胞的保护和支持都不如含有血清的培养基。


那么在细胞培养过程中,含动物源成分培养基与无动物源性培养基到底该如何选择?本期内容,就来盘点这二者的优缺点,希望对小伙伴们选择培养基或是血清提供帮助。


文章篇幅较长,目录已经搭好,供大家预览!


★ 目录 ★

含动物源成分培养基

无动物源成分培养基

动物源VS非动物源该如何选择?


一、含动物源成分培养基

1、典型代表:血清

这里以血清为典型动物源成分为代表。

血清的本质是血液或血浆经过凝血处理(血小板激活)后,再经过滤等处理所得到的上清液。有学者认为,血清中含有血小板激活后释放的各种生长因子,因此可以支持多种细胞生长。

2、含血清培养基优势

(1)含动物源成分,如血清,提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必需的物质。

(2)提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

(3)提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

(4)提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

(5)对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如硒等。


3、含动物源成分培养基不足

人用或兽用药物生产过程中,血清中不明成分,作为异源物质,可能会引起人或动物的免疫/排异反应。

二、无动物源成分培养基

1、无动物源成分培养基

基于生产药物的安全考虑,培养基中的添加组分无动物来源,需要的蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物,这些组分可以保障细胞生长及增殖的需要后来又衍生出*不用动物来源的蛋白(但有来自于植物蛋白的水解片段,或合成多肽片段等其他衍生物等部分添加物)的培养基。

2、无动物源成分培养基优势

避免所生产的药物,因动物源成分而产生的毒性。

3、无动物源成分培养基不足

(1)无法为细胞提供保护作用:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响。

(2)部分产品成本较高,保存条件要求严格。

(3)具有高度特异性:一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。

(4)容错性较差:而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。

(5)种类繁多,具有高度特异性:每一种类型的细胞都需要一种培养基配方。

(6)细胞增殖影响:通常在无血清培养基中细胞生长缓慢,有限细胞系的传代次数也减少。

动物源VS非动物源

如何选择?


含动物源成分培养与不含动物源成分培养基,各有优缺点,如何选择还是应该根据实验需求、使用场景来定。


某些特定的工业生产会更青睐无血清培养基(工业生产用的无血清培养基可以大批量生产,能将成本压至更低)。


而用于大部分科研的培养基,从实验成本和实验效果角度出发,绝大部分研究人员还是更偏爱血清培养基。


两大类型培养基的优缺点已经给大家梳理清楚,在选择培养基的时候更可以做到心中有数啦!


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