应对破坏细胞的支原体~qPCR支原体检测试剂来帮你

织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。

德国MB公司qPCR支原体检测试，该试剂盒采用荧光定量PCR技术，是已建立的检测方法，能一次检测欧洲药典（EP2.6.7）和日本药典（JP G3）提到的所有支原体物种，并且能与大多数仪器配合使用。

 

该试剂盒针对支原体基因组中的高度保守区，具有快速、耐用和灵敏的特点。

该试剂盒的设计满足欧洲药典和日本药典对于不同类型样本（如软骨细胞、血清、细胞培养上清）在DNA抽提后的检测标准。可直接检测细胞上清（研究领域），或者先对细胞培养物富集，或先抽提DNA。该试剂盒*符合EP2.6.7和JP G3的要求。

检测原理：

该试剂盒扩增柔膜体对应的16S rRNA上的特异序列， 而真核细胞和其他细菌DNA不会被扩增。

试剂盒说明书同时包括细胞培养上清筛查和遵循欧洲药典和日本药典检查的流程，包括对DNA抽提和对样本体积的规定。整个检测小于3小时。并且与ELISA、荧光染色和培养法不同的是，无须活支原体。和一些生化和细胞学方法相比，PCR具有更高的灵敏度和准确性。

试剂盒包含所有必要的PCR组分，

内控DNA可用于鉴定PCR抑制或DNA抽提问题带来的假阴性。内控DNA可直接加到PCR预混液里，或加到DNA抽提之前的样本中。它可用于验证DNA抽提和qPCR扩增过程。它可从Minerva厂家购买（货号11-9905）。内控对照的扩增结果在560nm检测（HEX通道），而支原体的扩增在520nm检测（FAM通道）。

试剂盒包括dUTP，它替代dTTP，方便用尿嘧啶DNA糖基酶（UNG）监视假阳性。该试剂盒不包含UNG。