干酪乳杆菌叶酸测定用培养基原理及测定菌种介绍
更新时间:2020-12-09 | 点击率:596
干酪乳杆菌叶酸测定用培养基采用干酪乳杆菌(ATCC7469)为测定用菌,用于叶酸的微生物法测定。它是基于Flynn等人(1)的配方,并经Baker等人(2)和Waters、Mollin(3)改良。用于维生素测定的测定菌通常需要三种培养基:维持培养基、接种培养基和测定用培养基。
叶酸的检测方法有许多种,主要根据测定试样来决定其测定方法。若测定叶酸药剂或制品中的叶酸含量,通常可采用高压液相色谱法、比色法、荧光分析法、紫外分光光度法以及薄层层析法等。若测定食品或植物中的游离叶酸,一般都采用微生物测定法。
常用的检测叶酸的干酪乳杆菌叶酸测定用培养基菌株有鼠李糖乳杆菌ATCC7469、粪链球菌以前被称为ATCC8043、啤酒小球菌ATCC8081。此3种微生物对不同形式叶酸的敏感度不同。粪链球菌只对非甲基化叶酸敏感,如叶酸(PteGlu)、二氢叶酸(DHF)和四氢叶酸(THF),可用于鉴别分析各种形式叶酸在不同检测物中的分布。啤酒小球菌对甲基化叶酸也不敏感。鼠李糖乳杆菌对单谷氨酸叶酸、含2或3个谷氨酸叶酸及其还原型衍生物均敏感,是3种微生物中反应谱带宽的一种,也是常用的菌种。
各种微生物生长需要有一些微量的专一生长因子,它们可能是维生素或氨基酸等。根据这种需求性为基础,设计出各种生长因子的定量法,选择那些以必需定量的营养物为必需生长因子的菌株,制备好*不含该营养物的定量培养基,再分别在干酪乳杆菌叶酸测定用培养基上加入标准营养物和待测样品,并定量地接种菌株进行培养。然后根据微生物生长随营养物加入量的不同而变化的情况,就可以对样品中的营养物进行定量。定量的方法有比浊法、酸度滴定法(试管法)、琼脂平板扩散法和质量法等。