动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来,经历了一个多世纪的发展,获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞,而且开发了人工合成培养基和无血清培养基,并且出现了细胞工程,哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用,用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了微载体、中空纤维管和生物反应器等,并且实现了一种不同以往的培养方式——灌注培养。目前,灌注培养已成为高产率培养细胞的主要方法。
灌注培养有四个特点:
一是能及时地补充营养物质和排出代谢产物,有利于细胞的扩增,实现高密度培养;
二是提供稳定的环境,有利于细胞的持续增殖;
三是可实现梯度培养,如梯度培养箱的腔面和基底面分别用不同的培养液灌注,更接近体内环境,可用于体外三维组织工程的构建。
四是灌注培养检测废液中葡萄糖和乳酸浓度,进而更清楚当前细胞培养微环境情况。
灌注培养可用含血清的培养基。但无血清培养基已成为发展的趋势。只是无血清开发成本高,应用范围窄,尚未全部替代含血清培养基。
目前市面上的血清品牌很多,可重点关注缔一生物提供的进口Ausbian精制新生牛血清。一般新生牛血清应具有如下特点:
1. 内毒素低,内毒素选取小于3Eu/ml,可以使细胞更健康。对于客户做实验更加顺利。如果选取内毒素较高的血清,细胞一直泡在毒液里,短期内试不出结果,用不健康的细胞做实验,对实验结果造成严重影响。
2. 原装试用,保证后续供货为同一个批次。客户试用好后对于购买的血清更加有把握,同一批次已经试过了,也保证了实验更加顺利。
3. 同一个批次数量多,2000瓶,可以长期不用换批次。保证了实验更加顺利的同时,节省了试用的时间和成本。
4. 多个批次可以选择。不限一次试用,可以适应不同课题。以保障实验顺利。
5. 多个课题组,客户在使用。相当于多个角度测试该批次血清,说明血清对于细胞实验的支持,保证了实验顺利。
符合要求的血清可用于细胞培养。
参考文献
唐光霞, 陈建苏. 灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用进展.眼科新进展.2010,30(5):486-491
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