支原体对细胞的不良影响，你应该早知道

近日《动物医学进展》上有一篇文章《支原体对细胞培养污染的研究概况》（动物医学进展，2013,34：112-117）谈到 “支原体污染细胞的严重性”，里面提到：

　　支原体早发现于1898年，1956年Robinson等*从细胞培养物中分离出支原体，之后国内外关于支原体污染细胞的报道屡见不鲜。它广泛存在于自然界中，有100余种，污染细胞chang见的支原体包括发酵支原体（ M.fementans）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginina）、梨支原体（M.pirum）、唾液支原体（M.salivarium）和人型支原体（M.hominis）。

支原体通常附着在细胞的表面，并影响其宿主细胞的生理、遗传等多方面的正常功能，用这些污染后貌似正常的细胞做实验或生产，将会严重影响结果。

A图为正常的牛源细胞系MDBK。B图为受到支原体污染的MDBK细胞。

　　1、对细胞生长繁殖和形态的影响

　　细胞培养物被支原体污染后生长减慢，且产生细胞病变，表现为细胞体积增大，碎片增多，在细胞质中产生一些颗粒；细胞内病毒繁殖受阻，使细胞形成空斑。光镜下形成不正常密度生长的单层，贴壁细胞形成“流沙样”脱落、裂解。某些支原体可在侵入细胞８小时使线粒体膨胀，继而被破坏，细胞核萎缩呈空泡化，细胞微管解聚，培养瓶中细胞与细胞间隙出现膜状沉积，细胞无法传代，甚至整个细胞群体溶解。

　　2、对细胞代谢和功能的影响

　　有些被污染后的细胞，虽形态上变化不明显，但培养液pH变化较大，更换培养液后几小时就变酸，培养基中的必需氨基酸被消耗掉，改变细胞代谢。

　　支原体吸附在细胞表面，破坏细胞膜的完整性，影响细胞信号传递；消耗细胞的核苷库，引起细胞染色体异常；发酵型支原体能迅速降解简单糖类，代谢产生的酸能改变细胞的功能；利用精氨酸的支原体则发生精氨酸效应，从而影响蛋白质和核酸的合成、导致细胞的分裂和生长受阻；

支原体还引起细胞酶谱改变；由于支原体对细胞膜的吸附，干扰膜受体的功能，改变信号传递，破坏膜的完整性。在单克隆抗体制备中，骨髓瘤或杂交瘤细胞因支原体的污染而导致融合失败或抗体分泌能力下降以至丧失。

　　3、引起染色体异常

　　改变染色体组型，通常可导致细胞染色体断裂、数目减少，出现双着丝点染色体、环状染色体等。

　　4、对免疫细胞产量的影响

　　支原体能影响巨噬细胞的活性，抑制干扰素的合成和降低其活性，加大了继发感染其他细菌和病毒的几率，同时，通过植物血凝素干扰淋巴细胞的刺激、分化。

　　因此，应定期对你养的细胞进行支原体的监测。支原体污染早期症状较清，肉眼看不出来。别让支原体毁了你的实验，浪费了你的时间。要想早期预防支原体，请选用一些支原体祛除剂（如ZellShield ）。要想监测是否有支原体，可选用一些支原体PCR检测试剂盒（如 “VenorGeM支原体检测试剂盒（一步法）），或可咨询了解具体的预防方案。

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