随着分子生物学的发展,核酸编辑、扩增、测序、鉴定等以核酸为中心的技术变得越来越先进和方便,尤其是单细胞RNA测序、数字PCR和转基因技术的出现,使得核酸技术应用越来越广泛,灵敏度越来越高。
也但同时也产生一些弊端,主要是:
1)PCR实验造成DNA大量合成,不可避免地给实验室带来核酸污染。由于核酸产物不能自动降解,因此只会不断积聚;
2)由于灵敏度升高,少量污染的DNA或RNA分子也会被检测出来,从而造成实验偏差。
3)核酸污染也给实验人员带来未知的健康风险。
而传统的紫外照射法对祛除DNA污染并不理想,因为它仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大。
那么,有没有一种更好的方法呢?
这里向您推荐一种高效祛除核酸污染的方法,即:使用德国Minerva Biolabs公司(简称MB)的PCR污染祛除剂PCR Clean™。
PCR Clean™有喷雾和湿巾两种样式,在1分钟之内即可有效地祛除核酸污染(对质粒、基因组和DNA、RNA扩增片段均高度有效),适合各种实验台、操作区域、设备和实验耗材,高效迅速,使用方便。
PCR Clean™简要介绍如下:
1产品信息(生产商:德国MB公司)
2产品的工作原理
通过中和降解,快速有效祛除物体表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,确保PCR结果的准确。
3产品特点
①快速有效。1分钟起效。
②使用方便。使用后用干净纸巾擦干即可。
③成分安全。非碱性,无致癌性。
④性能稳定:室温保存。65°C存放2周,也不影响产品品质。
4使用方法
1)实验操作台和常用耗材:将PCR Clean™喷在操作台或耗材表面,反应1分钟后,用干净纸巾擦干即可。
2) 电子设备:用PCR Clean™湿巾擦拭设备表面,反应1分钟后,用干净纸巾擦干即可。
3)移液枪:按厂家说明书从移液枪上拆下套筒。从套筒上取下密封圈和垫片,向套筒充分喷洒PCR Clean™,作用1分钟后即可用清水冲洗,晾干,再安装。
说明:PCR Clean™ 适用于玻璃、陶瓷、塑料、橡胶、不锈钢和贵金属。它不适用于轻金属和非铁金属。
5MB公司对PCR Clean™效果的验证
MB公司验证过PCR Clean™对塑料、玻璃、树脂玻璃、铝等材料上的核酸污染的祛除效果,发现PCR Clean™对来自所有检测表面的DNA扩增片段,质粒、基因组DNA和RNA污染的去除,是极为有效的,而且起效很快。去除结果还显示,和其他常见的DNA清除剂(如乙醇、异丙醇或洗洁精)比较,PCR Clean™的祛除效果和祛除效率都具有显著的优势(见下图)。
图:不同清除剂对树脂玻璃®(A)、铝(B)、千思板®(C)、玻璃(D)和塑料薄膜(E)上的大肠杆菌DNA扩增片段去除后,用qPCR进行检测后的扩增曲线。结果显示,PCR Clean™具有显著的优势。
因此,在PCR反应前后,经常使用PCR污染祛除剂PCR Clean™,会非常便捷,可理想地保持工作区域的清洁,避免核酸污染。同时节省时间和支出。而这些给分子生物学实验室和PCR工作台都会带来非常大的帮助。