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什么是胎牛血清,血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理

更新时间:2020-10-16  |  点击率:2388

血清就是去除了血细胞和纤维蛋白(用于凝血)的成分之后,剩下的血液中的液体。在细胞体外培养中常需要添加血清。血清是细胞所需的营养物质的天然来源,具有许多人工合成的培养基所不具备的营养因子。它的应用已经有了100多年的历史。那么血清里面含有什么成分呢?

例如《生物制品学杂志》 1981年第1期第22页上就发表过1篇《血清的性质:血清成分的分析》文章,作者是Macleod AJ等。这是一篇翻译。原始出处是AJ Macleod,O Drummond. Serum quality: an analysis of its components. Developments in Biological Standardization.1980,46:17。
该文章开始提到的是苏格兰国立输血站蛋白分离中心用序贯低温酒精沉淀法处理人血浆,得到了很多成分(注: 血浆是去除了血细胞的血液液体,和血清区别是含有纤维蛋白原),包括凝血因子、纤维蛋白原、免疫球蛋白、白蛋白、a球蛋白和b球蛋白,很多有重要的治疗作用。该中心曾在1年中处理了5万升血浆,得到了750kg的血浆蛋白。血浆蛋白中的许多蛋白质对细胞生长很重要,如铜蓝蛋白、转铁蛋白和生长调节素(somatomedin),还有一些蛋白酶抑制剂,如a-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III和a2-巨球蛋白。
该文还指出,胎牛血清蛋白含量一般低于新生牛或成牛血清。用醋酸纤维素电泳作蛋白成分分析,胎牛血清的白蛋白含量比其他血清高,而球蛋白的含量比其他血清低得多。
注:生长调节素(somatomedin)是过去使用的名字,是一类促进细胞生长分裂的物质。现已发现,胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是生长调节素A,玻连蛋白是生长调节素B,胰岛素样生长因子1(IGF-I)称为生长调节素C。
a1-抗胰蛋白酶:主要由肝脏合成,主要作用是保护机体正常细胞和器官不受蛋白酶的损伤,抑制感染和炎症,维持机体内环境的平衡。
a2-巨球蛋白:是血浆中分子量大的蛋白质。分子量约为65.2万-80万,含糖量约8%,由4个亚单位组成。它与淋巴网状系统细胞的发育和功能有密切联系。
球蛋白主要与机体免疫功能有关。
怀孕5-8个月的母牛被屠宰,发育未*的牛胚胎心脏穿刺采血获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育*这些因子自动消失。
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但pu遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400转/分离心1-2分钟,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。hao不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。在解冻血清时,建议随时将血清摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
 

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