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怎么大限度的使用胎牛血清

更新时间:2020-09-16  |  点击率:605

胎牛血清是细胞培养重要的培养基且不可替代,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养。

 

因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。

正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:

1. 正确储存,避免反复冻融

1)   血清在-20°C冻存。

2) 血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。

3) 血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。

4)血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。

2. 正确的融化

上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。具体如下:

3. 关于胎牛血清的灭活

真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。

4. 胎牛血清的浓度

胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成*培养基。

曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体jia浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。

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