快速显色微生物培养基灭菌效果不好?主要是以下原因造成的
更新时间:2020-09-08 | 点击率:749
快速显色微生物培养基是一种新型便捷的微生物分离和鉴定培养基,近年来,已被各领域广泛应用。但是使用中有人遇到灭菌效果不好的现象,下面告诉你怎么回事。
原因:
1.营养成分的保持
湿热灭菌时,微生物被杀死的同时,培养基的营养成分也遭到了一定的破坏,特别是氨基酸和维生素。如在121℃,仅20min,就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏,蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏。在热的作用下某些营养成分还可能因受热而相互之间发生反应,造成快速显色微生物培养基中原有营养成分的数量变化,因而影响质量。
2.微生物的耐热性
细菌芽孢的热阻较大,灭菌所需要的时间取决于把细菌芽孢减少到所规定数目的时间。
3.pH值
pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值介于6.0~8.0时,微生物不易死亡。pH<6.0时,微生物比较容易死亡,此时H+很容易渗入微生物的细胞,从而改变细胞的反应,促使其死亡。所以培养基的pH越低,所需的时间也越短。
4.培养基成分
油脂、糖类及蛋白质等组成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜、影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。例如:大肠杆菌在水中加热至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加热4-6分钟才死亡,在30%糖液中需30分钟才死亡。一般糖类含量较多的时候选用115℃,30分钟;一般的培养基可选择121℃20分钟。
5.灭菌锅内空气是否排净
这个是影响快速显色微生物培养基灭菌是温度和压力比例关系的要点,同样达到了相同的压力的情况下,如果空气未能排净,也就是说不是纯蒸汽灭菌,此时的温度不一定能达到目的要求,会严重影响灭菌效果。