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支原体核酸法的特异性验证

更新时间:2020-07-07  |  点击率:799

支原体核酸检测法包括常规PCR法和qPCR法。和传统方法比较,它具有:

①灵敏度高,特异性好。

②时间短,2-3小时出结果。

③操作简单等特点。

因而在科研和生物制药工业具有广泛的应用。

欧洲药典也指出,核酸法可替代传统的培养法和DNA染色法,但需要对检测限、特异性和耐用性进行方法学的评估。

 

欧洲药典根据支原体在细胞培养中发生的频率,提出: 核酸法应能至少检测如下9种支原体,即精氨酸支原体、口腔支原体、鸡败血支原体、肺炎支原体、关节液支原体、发酵支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾原体和柠檬螺原体。

 

对于特异性的验证方面,欧洲药典指出,应选用不同于支原体的合适的细菌物种,其中合适的是与支原体有密切亲缘关系的细菌属,它们包括梭菌、乳酸杆菌和链球菌。

 

由于核酸法的特异性主要受到引物设计、探针和PCR扩增检测时的反应条件影响,不同检测试剂盒的性能也会有一些不同,因此特异性的验证是非常必要的。如果发现某细菌菌株与支原体有交叉反应,那么对于核酸法的阳性结果,还需要采用第二种方法进行证实。

之前小编向您介绍过德国MB公司(Minerva Biolabs)的灵敏度验证标准品,这次向您介绍的是德国MB公司提供的特异性验证用标准品。

产品介绍

核酸法特异性验证用标准品

 

1. 支原体基因组DNA标准品

用途:用于PCR和qPCR方法对支原体物种的特异性检查。

 

货号

基因组DNA产品

51-0116

莱氏无胆甾原体基因组DNA

Acholeplasma laidlawii

51-0129

精氨酸支原体基因组DNA

Mycoplasma arginini

51-0117

发酵支原体基因组DNA

Mycoplasma fermentans

51-0195

生殖支原体基因组DNA

Mycoplasma genitalium

51-0130

猪鼻支原体基因组DNA

Mycoplasma hyorhinis

51-1746

渗透支原体基因组DNA

Mycoplasma penetrans

51-0124

关节液支原体基因组DNA

Mycoplasma synoviae

51-0162

关节炎支原体基因组DNA

Mycoplasma arthritidis

51-0115

鸡毒支原体基因组DNA

Mycoplasma gallisepticum

51-0111

人型支原体基因组DNA

Mycoplasma hominis

51-0112

口腔支原体基因组DNA

Mycoplasma orale

51-0119

肺炎支原体基因组DNA

Mycoplasma pneumoniae

51-0164

柠檬螺旋原体基因组DNA

Spiroplasma citri

51-0177

解脲支原体基因组DNA

Ureaplasma urealyticum

 

 

每盒含1管支原体基因组DNA(10ng ±2ng)+

1管200μl 10mM Tris缓冲液(pH8.5)

 

2. 细菌基因组DNA 标准品

用途:用于PCR和qPCR方法的特异性验证。

 

货号

基因组DNA产品(共64种)

2130-07288

洋葱伯克霍尔德菌基因组DNA

Burkholderia cepacia

51-0101

嗜肺军团菌基因组DNA

Legionella pneumophila

51-1514

嗜肺军团菌弗雷泽亚种基因组DNA

Legionella pneumophila subsp. fraseri

51-1515

嗜肺军团菌牧场亚种基因组DNA

Legionella pneumophila subsp. pascullei

51-1368

博兹曼氏军团菌基因组DNA

Legionella bozemanii

51-1370

杜莫夫氏军团菌基因组DNA

Legionella dumoffii

51-1533

约旦军团菌基因组DNA

Legionella jordanis

51-1723

嗜酸乳杆菌基因组DNA

lactobacillus acidophilus

51-0566

肺炎链球菌基因组DNA

Streptococcus pneumoniae

51-0792

丙酮丁醇梭菌基因组DNA

Clostridium acetobutylicum

51-5571

百日咳杆菌基因组DNA

Bordetella pertussis

51-3415

副百日咳杆菌基因组DNA

Bordetella parapertussis

2102-04688

空肠弯曲菌基因组DNA

Campylobacter jejuni

51-1386

白色念珠菌基因组DNA

Candida albicans

2103-11226

光滑念珠菌基因组DNA

Candida glabrata

2104-11947

吉利蒙假丝酵母基因组DNA

Candida guilliermondii

2127-30007

鲍曼不动杆菌基因组DNA

Acinetobacter baumannii

2128-30187

嗜水气单胞菌基因组DNA

Aeromonas hydrophila

2101-00819

烟曲霉基因组DNA

Aspergillus fumigatus

51-0031

蜡样芽孢杆菌基因组DNA

Bacillus cereus

51-0010

枯草芽孢杆菌基因组DNA

Bacillus subtilis

2129-02046

苏云金杆菌基因组DNA

Bacillus thuringiensis

2105-70624

希木龙念珠菌基因组DNA

Candida haemulonii

2125-90874

热带念珠菌基因组DNA

Candida tropicalis

2106-30039

弗氏柠檬酸杆菌基因组DNA

Citrobacter freundii

2107-04595

克氏柠檬酸杆菌基因组DNA

Citrobacter koseri

2108-00756

产气荚膜梭菌基因组DNA

Clostridium perfringens

51-0053

产气肠杆菌基因组DNA

Enterobacter aerogenes

2111-20680

铅黄肠球菌基因组DNA

Enterococcus casseliflavus

51-0478

粪肠球菌基因组DNA

Enterococcus faecalis

2114-20160

希氏肠球菌基因组DNA

Enterococcus hirae

2115-08579

大肠杆菌0157:H7
基因组DNA

Escherichia coli 0157:H7

2131-05934

嗜热脂肪土芽孢杆菌基因组DNA

Geobacillus stearothermophilus

2133-70603

耐药型肺炎克雷伯菌基因组DNA

Klebsiella pneumoniae, ESBL+

51-1370

杜氏荧光杆菌基因组DNA

Fluoribacter dumoffii

2110-30054

阴沟肠杆菌阴沟亚种基因组DNA

Enterobacter cloacae subsp. cloacae

2112-30633

耐久肠球菌基因组DNA

Enterococcus durans

2113-20477

屎肠球菌基因组DNA

Enterococcus faecium

51-0083

大肠杆菌基因组DNA

Escherichia coli

2132-30104

肺炎克雷伯菌基因组DNA

Klebsiella pneumoniae

2134-30164

摩氏摩根菌基因组DNA

Morganella morganii

51-4479

奇异变形杆菌基因组DNA

Proteus mirabilis

51-0071

铜绿假单胞菌基因组DNA

Pseudomonas aeruginosa

2117-30121

粘质沙雷氏菌基因组DNA

Serratia marcescens

2138-05570

宋内志贺氏菌基因组DNA

Shigella sonnei

51-0231

金黄色葡萄球菌基因组DNA

Staphylococcus aureus

2118-20328

人葡萄球菌基因组DNA

Staphylococcus hominis

2120-20229

腐生性葡萄球菌基因组DNA

Staphylococcus saprophyticus

2122-20480

牛链球菌基因组DNA

Streptococcus bovis

2126-20523

变形链球菌基因组DNA

Streptococcus mutans

2139-20068

血链球菌基因组DNA

Streptococcus sanguinis

2140-04780

结肠炎耶尔森菌

Yersinia enterocolitica

51-3361

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌

Methicilin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)

51-0030

藤黄微球菌基因组DNA

Micrococcus luteus

2135-10036

脑膜炎奈瑟氏菌基因组DNA

Neisseria meningitidis

2136-13387

普通变形杆菌基因组DNA

Proteus vulgaris

51-7058

肠道沙门氏菌基因组DNA

Salmonella enterica

2137-04782

福氏志贺氏菌基因组DNA

Shigella flexneri

51-0164

柠檬螺旋原体基因组DNA

Spiroplasma citri

51-0044

表皮葡萄球菌基因组DNA

Staphylococcus epidermidis

2119-20263

溶血性葡萄球菌基因组DNA

Staphylococcus haemolyticus

2121-50170

嗜麦芽寡养单胞菌基因组DNA

Stenotrophomonas maltophilia

2123-06176

无乳链球菌基因组DNA

Streptococcus dysgalactiae

2141-08992

假结核耶尔森菌基因组DNA

Yersinia pseudotuberculosis

 

 

以上每盒细菌基因组DNA 标准品规格为≈10 ng。

 

说明:

1. 基因组DNA来自确定的微生物物种(有NCTC编号),且传代次数较少。

2. 基因组DNA经吸附柱的方法抽提,并经部分测序以验证其物种。

3. DNA的量和质量均采用标准方法进行评估。

4. 每个批次标准品厂家均提供质控证书(COA)。

5. 基因组DNA为冻干粉,附带的Tris缓冲液用于溶解DNA冻干粉,具体操作见质控证书。

6. 基因组DNA标准品均为室温运输,2-8℃保存。

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