方法验证用100CFU™支原体标准品

支原体核酸检测法（常规PCR、荧光定量PCR）应用于细胞培养、生物制药工业和细胞治疗领域具有很多优势。和传统方法比较，它具有①灵敏度高，特异性好。②时间短，2-3小时出结果。③操作简单等特点，可替代传统的培养法和DNA染色法。

欧洲药典（EP 2.6.7）规定，支原体核酸法如要替代【指示细胞培养法】（又称为DNA染色法），需要验证核酸法灵敏度达到100CFU/ml，并根据支原体污染发生的频率，推荐选择下列9种支原体进行检测：

• 精氨酸支原体
• 口腔支原体
• 鸡败血支原体
• 肺炎支原体
• 关节液支原体
• 发酵支原体
• 猪鼻支原体
• 莱氏无胆甾原体
• 柠檬螺原体

据小编市场调查后发现，德国MB公司（全称Minerva Biolabs）生产的【100CFU^TM灵敏度标准品】广泛被国内外各大药厂用于支原体核酸法的方法学验证，被称为该领域的“金标准”。

【100CFU^TM灵敏度标准品】为冻干粉形式，一共有10种（见下表），其中涵盖了欧洲药典（EP 2.6.7）列举的9个支原体物种，可用于qPCR和PCR方法的灵敏度以及耐用性验证，使得核酸法可作为DNA染色法的替代方法。

保存：冻干粉在2-8℃保存

产品特点：

1) 来自英国菌种保藏中心NCTC，为标准支原体株

2) 支原体已灭活，不会对实验室造成污染，保障细胞实验室安全

3）传代次数少，支原体无变异

4）产品为冻干粉，保证其稳定性

5）分析证书（COA）提供该批次GU：CFU比值（支原体基因组/菌落数比值）

注意：

1.使用时，应严格遵循说明书操作流程。任何偏离可能会造成结果误差。

2.加入100CFU标准品的样品不能超滤浓缩，否则会导致结果不可靠。

3.标准品不建议稀释。

使用说明：

试剂使用前，先达到室温平衡。

阴性对照样品的制备，步骤同上。推荐适当重复试验，并推荐使用MB公司的常规PCR检测试剂盒 (品名：Venor®GeM Classic， 货号11-1025/-1050/-1100/-1250) 或qPCR试剂盒 (品名：Venor®GeM qEP，货号11-9025/-9100/-9250)。