大肠杆菌显色培养基在实验过程中要怎么操作及注意些什么

　　大肠杆菌显色培养基的原理

　　结合了显色原和荧光基团，检测β-葡萄糖醛酸酶的存在

　　大肠杆菌-蓝至绿色，阳性β-葡萄糖醛酸酶和阳性荧光

　　其他大肠菌群-无色，阴性β-葡萄糖醛酸酶和阴性荧光

　　胆盐混合物增加选择性-革兰氏阳性菌被抑制

　　操作步骤：

　　1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液

　　2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上

　　3、36±1℃培养18～24h，选用有30～200个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。

　　总大肠杆菌=蓝绿色菌落

　　4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36±1℃培养12-16小时，挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验

　　大肠杆菌显色培养基操作注意事项

　　1、切片脱蜡应尽量干净。

　　2、组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。

　　3、经典三色染色中，常要求使用试剂（A）染核，也可用苏木精染核，但苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。

　　4、试剂（B）的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和新旧而定，。

　　5、试剂（E）为0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清晰鲜艳，如果使用量大可自行配制。

　　6、用试剂（F）分化要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色；纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1～2min。

　　7、返蓝液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot促蓝液或0.1～1%碳酸锂水溶液，该产品森贝伽有售。

　　8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

　　9、使用场所应通风，并远离火源。

　　以上便是今天关于大肠杆菌显色培养基在实验过程中要怎么操作及注意些什么的全部分享了，希望对大家今后使用本设备能有帮助。