胎牛血清在培养细胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。本文缔一生物为您详细解读胎牛血清的三步融化法。
回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。哪个速度对保留活性更好?不言而喻!
下面,我们详细解读『血清的三步融化法』的步骤:
图:刚从-28℃拿出的血清,是这个样子的
融化血清一步
温度:室温
时间:100ml - 35分钟
500ml - 90分钟
1000ml - 100分钟
或
温度:15-20℃水浴(新接的自来水24℃上下)
时间:100ml - 5分钟
500ml - 18分钟
1000ml - 20分钟
图:这是近Ausbian血清的大区经理,在天津血研所实验室拍到的——实验人员三步法化血清的图片,为了节约时间,实验人员采取的是一步20℃水浴18min的方法。(用现接的自来水放入冰冻的血清,即可达到20℃水浴的效果。一般实验室没有能制冷到20℃的水浴锅)
融化血清第二步
温度:20℃水浴(新接的自来水24℃上下)
时间:100ml - 15分钟
500ml - 25分钟
1000ml - 30分钟
图:第二步,仍旧是新接的自来水浴,25min
融化血清第三步
温度:37℃水浴
时间:100ml - 20分钟
500ml - 35分钟
1000ml - 45分钟
第三步,将血清置于37℃水浴锅中进行融化,大约30nmin左右,血清就*融化,可以分装了。
图:大家看,使用三步法融化的血清十分清亮,养细胞的效果也是棒棒哒。
综上所述,您是不是已经对胎牛血清的三步融化法,有所了解。如果还有其他疑问,请咨询缔一生物/缔一生物资深专家。