粘菌素耐药菌显色培养基

粘菌素耐药菌显色培养基

HiCrome™ Colistin Resistant Agar Base

用途

分离和鉴别革兰氏阴性粘菌素耐药菌

原理

粘菌素耐药菌显色培养基是用于检测和鉴别耐粘菌素的肠杆菌科、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和沙门氏菌。粘菌素被认为是后选择的抗生素，因为它有副作用，包括肾毒性和耳毒性，它对革兰氏阴性菌具有广谱的活性。（1,5）。但随着多发性耐药的革兰氏阴性菌的感染率增加，粘菌素再次成为一种治疗制剂。中国鉴定了由mcr-1 pEtN基因引起的质粒介导的粘菌素（COL）耐受（6）。近的临床数据还表明，如果采取某些预防措施，粘菌素的使用是可接受的（2）。

培养基中的酸水解酪蛋白提供氮源和碳源化合物、长链氨基酸、硫和其他必需营养素。掺入的显色混合物有助于颜色鉴别。显色底物被粘菌素抗性大肠杆菌产生的β-D-半乳糖苷酶特异性裂解，产生粉红色至紫色的菌落。而粘菌素抗性肺炎克雷伯菌裂解另一种显色底物，产生金属蓝色的菌落。假单胞菌产生的无色菌落可能含有轻微的绿色的色素。来自蛋白胨的苯丙氨酸和色氨酸有助于检测色氨酸脱氨酶活性，指示变形杆菌、摩根菌和普罗维登西的存在，它们菌落呈现褐色。

该培养基是用作筛选培养基。分离的菌株应遵循CLSI指南，进一步检测分离菌株对粘菌素的敏感性。

样本类型

临床样本（注：用于体外诊断。该培养基具有CE注册登记）

样本依照相关指南进行处理（3,4）

培养基成分

终pH值（25°C）7.3±0.2

配制 
取38.50克溶1L蒸馏水，加热至沸使培养基*溶解。15磅121°C高压灭菌15分钟。冷却至45-50°C。加入1管复溶的添加剂FD355，溶解冷却后倾注平板。

局限

基于粘菌素、氨苄青霉素、阳离子甾体化合物共同的结构特征，可能存在交叉反应

和敏感菌株比，粘菌素耐药菌的MIC值可能升高几百倍

需要生化试验进行终的菌种鉴定

粘菌素耐药菌需要微量肉汤稀释法进行确证

性能与评价

在保质期和正确存储前提下，按照说明书操作，即可保证培养基的性能。

质量控制

外观——淡黄色均匀自由流动的粉末

成胶性——牢固，与1.7％琼脂凝胶相当

成品培养基颜色和透明度——平皿中为淡琥珀色，透明或轻微不透明凝胶

配比反应——3.85%w/v（3.85g/100ml蒸馏水）水溶液在25℃的pH值为7.3±0.2

规定pH值——7.10-7.50

培养反应

35-37°C 孵育18-24小时

*为WDCM编号

参考文献

1. Cheng YH, Lin TL, Pan YJ, Wang YP, Lin YT, Wang JT.2015. Colistin resistance mechanisms in Klebsiella pneumoniae strains from Taiwan. Antimicrob Agents Chemother 59:2909–2913. doi:10.1128/AAC.04763-14.

2. 2. Falagas ME, Rafilidis PI.2009. Nephrotoxicity of colistin: new insight into an old antibiotic. Clin.Infect. Dis. 48:1729-1721.

3. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2nd Edition.

4. Jorgensen, J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.

5. Lim LM, Ly N, Anderson D, Yang JC, Macander L, Jarkowski A, Forrest A, Bulitta JB, Tsuji BT.2010. Resurgence of colistin: a review of resistance, toxicity, pharmacodynamics, and dosing. Pharmacotherapy 30:1279–1291. doi:10.1592/phco.30.12.1279.

6. Liu YY, Wang Y, Walsh TR, Yi LX, Zhang Retal. Emergence of plasmid-mediated colistin resistance mechanism MCR-1 in animals and human beings in China: a microbiological and molecular biological study. Lancet Infect Dis 2016;16