大肠杆菌O157计数培养基（膜过滤法）

大肠杆菌O157计数培养基（膜过滤法）

用途　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

推荐用于薄膜过滤法初步计数食品中大肠杆菌O157:H7

原理

该培养基推荐用于从肉、禽、奶、婴儿配方乳等食品中分离大肠杆菌O157：H7（1,2）。它基于三种生化反应（酶）进行鉴别——葡萄糖醛酸酶、山梨醇发酵和赖氨酸脱羧酶（4），大肠杆菌O157为(-)(-)(+)。

培养基中的细菌会先发酵葡萄糖。葡萄糖耗竭后发酵山梨醇，导致pH值下降（酚红为指示剂），使菌落呈黄色。培养基还含有β葡萄糖醛酸酶的显色底物，使菌落为蓝色。对于山梨醇发酵（+）菌或赖氨酸（-）菌，其菌落中的蓝色和黄色叠加为绿色。培养基中有赖氨酸，使赖氨酸脱羧酶阳性菌代谢后使pH值升高，产生粉色菌落。抑制剂中的莫能菌素抑制革兰阳性菌，在44-44.5℃孵育可抑制革兰阴性菌，

该培养基也用于食品中的大肠杆菌计数（3）。

培养基成分

组成                         克/升

动物组织酶解物         5.000

酵母粉                      3.000

氯化钠                      5.000

赖氨酸                      10.000

山梨醇                      20.000

葡萄糖                      2.500

硫酸镁                      1.500

脱氧胆酸钠               0.150

葡萄糖醛酸钠            0.500

酚红                         0.120

显色混合剂               0.050

琼脂                        15.000

终 pH (25°C) 7.2±0.2

配制                                         

62.82g重悬于1000ml蒸馏水，加热至沸腾使*溶解。请勿高压灭菌。冷却至45-50°C，无菌加入1管添加剂（FD295），混匀并倾注平板。

培养结果　　　　 　 　 　 　 　 　 　

加入添加剂（货号FD295）后，44 -44.5°C培养18-24小时，结果如下：

大肠杆菌——绿色

大肠杆菌O157:H7——粉色

肺炎克雷伯菌——黄色

脱氧胆酸钠和添加剂增加选择性——革兰氏阳性菌被抑制

参考文献

1.Entis, P.,and I. Lerner.1997. 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 60:883-890.

2.Entis, P.1998. Direct 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the hydrophobic grid membrane filter,followed by serological confirmation : collaborative study.J.AOAC Int. 81:403-418.

3.Entis, P., and I.Lerner. 1998. Enumeration of #-glucuronidase positive E.coli in foods by using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 61:913-916.

4.Corry J.E.L, Curtis G.D.W., Baird R.M., Culture Media for Food Microbiology, Progress in Industrial Microbiology, Volume 37.