大肠杆菌O157选择性显色培养基（国标）

原理

肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌（VTEC/EHEC）。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素（3），但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。

该款显色培养基采用植物源蛋白胨，以取代动物源，避免了BSE/TSE风险。它基于 Rappaport 和Henigh（1）描述的配方而成。培养基含山梨醇和显色混合剂，不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌O157：H7 特异性裂解，产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。

培养基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性（2）。添加剂中的亚碲酸钾选择性抑制气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素抑制革兰阳性菌。月桂基硫酸钠抑制伴随的革兰阳性菌群。

培养基成分

组成                                G/L

HiVeg的水解物                   5.000

酵母粉                           3.000

山梨醇                           7.000  

合成离子活性剂1号         1.500

月桂基硫酸钠                  0.100

显色混合剂                     0.250

琼脂                              15.000

终pH（25°C） 6.8±0.2

配制

31.85g溶于990ml蒸馏水，加热至沸使*溶解。高压灭菌后，冷却至45-50℃，无菌加入复溶的添加剂（货号FD187，先用10ml蒸馏水复溶）。混匀并倾注平板。

质量控制

外观：奶油色至黄色均一自由粉末

成胶性: 牢固，与1.5%琼脂相当

制备好的培养基颜色和透明度：在平皿中为浅琥珀色，透明至轻微不透明凝胶

配比反应：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值为6.8±0.2

pH值要求：6.60-7.00

培养反应：

加入添加剂（货号FD187）后，在35-37°C培养18-24小时，观察如下：

参考文献

1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.

2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.

3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85