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检测水中单增李斯特氏菌的HiMedia显色培养基

更新时间:2019-10-21  |  点击率:898

现在,市面上能见到的显色培养基大多用于食品和临床,但HiMedia厂家生产的显色培养基覆盖面广,能用于供水行业和环境监测站。下面为您介绍一下。

 

显色培养基的评价常有多个指标,如灵敏度,特异性等,它们也与所检测的样本类型有关。生产厂家经常不提供这些指标。但一些第三方检测中心或研究机构对此则有相关研究,并发表在专业期刊上。

 

2011年,《学术研究期刊》发表了一篇对显色培养基的比较研究。作者来自埃及国家研究中心水污染研究部,他们通过用显色培养基检测了水中的单核细胞增生李斯特氏菌,对显色培养基进行了评价(见参考文献1)。

 

作者指出,单核细胞增生李斯特菌是广泛存在的食品致病菌,致死率较高(>20%)。它从家禽、鳟鱼、壁虱、甲壳类,水、污水、植被、食品中已能被分离出来。对于人类而言,食品和水是常见的致病源。

 

传统的培养法分离李斯特菌属费力耗时,需要增菌乃至预增菌使水中低丰度的单增李斯特菌得到恢复。显色培养基的出现可改善这一检测方法。

 

研究者收集了尼罗河地表水的60个水样本。收集水平遵照了200年APHA发布的指南。所有水样均收集在无菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和国产),并在4℃条件下运输到实验室。所有样品在收集后6小时内进行细菌学检查。

 

研究用的单增李斯特氏菌标准菌株编号为NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生产的HiCrome Listeria Agar Base(以下简称HLA)。这款显色培养基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶与鼠李糖发酵。β葡萄糖苷酶裂解显色底物,使得李斯特菌属菌落呈现蓝色,而其他菌属为白色。李斯特菌的内部鉴别是基于鼠李糖发酵。单核细胞增生李斯特菌为蓝绿色菌落。研究者还采用了另一个公司生产的BBL CHROMagar显色培养基(以下简称BBL)。

 

研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜过滤法对单核细胞增生李斯特氏菌进行了检测和计数。滤膜放置在培养基上,37℃倒置孵育24小时。对典型菌落计数,单位为CFU/100 ml。菌落的进一步确证采用PCR法。终计算得出灵敏度(真阳性率)、特异性(真阴性率)、总有效率(即(真阳性+真阴性)×100/总数),并进行统计学分析(t检验)。

 

结果见表1、表2、表3和表4。

 

表1. 在不同培养基上,单增李斯特氏菌标准菌株的菌落特征

菌株

培养基

阳性菌落

正确数 (%)

假阴性菌落

假阴性数(%)

单核细胞增生李斯特氏菌

HLA

蓝绿色

31 (96.9)

白色

1(3.1)

BBL

蓝绿色

30 (93.8)

蓝色至蓝绿色

2(6.2)

 

表2. 非单增李斯特菌菌株在不同培养基上的菌落情况

菌株

培养基

真阴性结果 (%)

假阳性结果(%)

E. coli O157:H7

HLA

10 (100)

0(0.0)

BBL

9 (90.0)

1(10.0)

 

表3. 培养基分离标准菌株的有效性

 

HLA

BBL

PCR

真阳

31

30

31

真阴

10

9

9

假阳

0

1

1

假阴

1

2

1

灵敏度

96.8%

93.7%

96.8%

特异度

100%

90%

90%

有效率

97.6%

92.8%

95.2%

 

表4. 60个尼罗河水样在不同培养基上单增李斯特菌的假阳性率

 

分离株数量

假阳性数(%)

HLA

40

2(5.0)

BBL

40

5(12.5)

 

由上表可见,HiMedia的李斯特菌显色培养基(HiCrome Listeria Agar Base)灵敏度为96.8%,特异度为100%,并已被PCR进一步确证,令人满意,且好于另外一种品牌的显色培养基。作者认为,HiMedia的李斯特菌显色培养基不失为一种灵敏、快速、特异的方法,并且无须任何确证试验。

 

HiMedia公司是微生物产品生产商,具有40多年生产研发经验,具有WHO-GMP认证、ISO9001,ISO13485质量体系认证和CE、FDA注册登记。产品已行销世界上140多个国家。

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来的服务。

 

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