HiMedia公司生产的沙门氏菌动力生化试剂盒(货号:KBM002,品名:HiMotility™ Biochemical Kit for Salmonella)是HiBio-IDTM系列菌种鉴定试剂盒的一种,可用于鉴定食品、药品、临床、环境等样本中的沙门氏菌,也可用于验证已知的实验室菌株。
KBM002可鉴定的菌种包括:沙门菌伤寒血清型、沙门菌鸡血清型、鼠伤寒沙门菌、沙门菌大部分血清型、猪霍乱沙门菌的部分亚种、肠道沙门菌的部分亚种等。
本试剂盒包含11种生化反应:1.动力试验2.柠檬酸盐利用试验3.尿素酶试验4.精氨酸脱羧试验5.赖氨酸脱羧试验6.H2S产生试验7.ONPG试验8.阿拉伯糖发酵试验9.乳糖发酵试验10.麦芽糖发酵试验11.海藻糖发酵试验。
待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可在营养琼脂(M001)或鉴别培养基如麦康凯琼脂(M082)上挑取一个菌落,接种在5ml脑心浸膏肉汤中,在35-37℃培养4-6小时,直到在620nm处,接种液浊度≥0.1OD或0.5 Mcfarland标准。
划线接种第1孔,不要接种第2孔,用接种环接种第3至第12孔。在35℃-37℃孵育18-24小时,结合结果诠释表判定结果。(若细菌可运动,则粉色菌落从第1孔运动到第2孔。)
图1:HiMedia生产的用于菌种鉴定的HiBio-IDTM系列试剂盒
表1中,KBM002对沙门菌伤寒血清型、猪霍乱沙门菌猪霍乱亚种的判定特征,与《常见细菌鉴定手册》—“表3-4 肠杆菌科内中鉴别表”中描述的伤寒沙门氏菌相关特征*一致。(该书在《一般细菌常用鉴定方法》的基础上编写,介绍了伯杰系统、常见细菌检索、鉴定方法系统等,由东秀珠、蔡妙英等编著,科学出版社2001年出版)
表1:KBM002沙门氏菌显色特征判别表
运动性 | 柠檬酸盐利用试验 | 尿素酶试验 | 精氨酸双水解酶 试验 | 赖氨酸脱氢酶 | H2S 产出 | ONPG | 阿拉伯糖发酵 | 乳糖发酵 | 麦芽糖发酵 | 海藻糖发酵 | |
沙门菌伤寒血清型 | + | - | - | - | + | + | - | - | - | + | + |
猪霍乱沙门菌猪霍乱亚种 | + | + | - | V | + | + | - | + | - | + | + |
KBM002具有欧盟体外诊断医疗器械注册资格(欧盟IVDD),操作步骤简单,准确率更高(99%),可以更快得到鉴定结果。
KBM002适用于多种行业检测标准。如我国现行的GB/T 4789.4-2016食品微生物学-沙门氏菌检验、标准ISO 6579-1:2017 沙门氏菌属检测中规定,可使用生化鉴定试剂盒鉴定沙门氏菌菌种,便于进行后续试验。
KBM002也曾被用于研究Al-Najaf和Al-Muthana省肉鸡养殖场分离的沙门氏菌的耐药性(1),以及研究沙门氏菌引起肠炎的毒力基因(2)等。
参考文献:
1.Abdullah O. Mansour, et al. Antimicrobial resistance pattern and RAPD profile of Salmonella Ohio isolated from broiler farms in Al-Najaf and Al-Muthana provinces.Kufa Journal For Veterinary Medical Sciences . 2013, 4(2): 18-30
2.Kareem T,et al. Detection of Some SalmonellaEnteritidisVirulence Genes by Multiplex-PCR Assay Using Two Different DNA Extraction Methods.L-Qadisiya Medical Journal.2014,10(18):63-70
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