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不动杆菌显色培养基的应用

更新时间:2019-07-26  |  点击率:1310

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii),属于革兰氏阴性菌,是一种严格需氧、非乳糖发酵的条件致病菌,移动性不高,但生命力*,可广泛地存在于大自然中。

 

该菌是不动杆菌属细菌中在医院感染中常见的一种,也是水产养殖业动物的病原菌。它通常会引起菌血症,肺炎,脑膜炎,腹膜炎,心内膜炎,以及泌尿道和皮肤感染。鲍曼不动杆菌已经成为医院感染的主要来源,尤其是重症监护室。

 

近些年来,鲍曼不动杆菌被人们发现对许多常用的抗生素都耐药,包括β内酰胺类和氨基糖甙类。其中,需要机械通气的免疫力下降患者具有感染不动杆菌的高风险。

 

而鲍曼不动杆菌的传统检测方法相较困难,一方面由于大量抗生素及化疗约物的应用,导致细菌生物学特性发生变化,影响细菌细胞壁的合成及细胞膜的通透性,且由于该菌初次分离时伴有其他杂菌生长,虽然鉴定所用为单个菌落,但多种细菌共存于一个平板,各菌在生长代谢过程中可能会产生一些物质,干扰鲍曼不动杆菌的正常生长。

 

另一方面传统鲍曼不动杆菌的检测鉴定操作要求严格,存菌液的浓度、均匀度、温度及细菌的纯度等多方面都有其特定的要求。鲍曼杆菌的生化反应较弱,大多生化反应均为阴性,若实际操作过程中在某一方面不够重视,或某一生化反应的差异导致细菌鉴定结果的不同,都可能导致鉴定结果的差异。

 

因此,能够而快速的检测多重耐药的不动杆菌尤为重要。不动杆菌显色培养基(货号:M1938,Hicrome Acinetobacter Agar Base)【需要其中一种添加剂:MDR 选择性添加剂(货号:FD271)/利兹不动杆菌选择性添加剂(货号:FD335)】适用于检测从环境和临床样本中选择性分离多重耐药不动杆菌,35-37°C培育24-48小时即出结果(如下图,多重耐药不动杆菌菌落显紫色)。

该显色培养基中的复合显色剂针对的是不动杆菌的特异性酶,因此特异性高,优于传统的以生化代谢反应为分离基础的利兹不动杆菌琼脂(Leeds Acinetobacter Agar Base,HiMedia货号M1839)。

 

培养基所需的添加剂如FD271为氨苄青霉素钠盐和头孢他啶,可选择性分离耐药型不动杆菌。该培养基中的特别蛋白胨提供氮源、碳源化合物、氨基酸、维生素和其他必要的生长因子。氯化钠维持渗透压平衡。选择因子抑制革兰氏阳性菌。

 

非耐药型不动杆菌不会在该培养基上生长,而耐药型不动杆菌如鲍曼不动杆菌ATCC BAA-1605(对头孢他啶、庆大霉素、替卡西林、哌拉西林、氨曲南、头孢吡肟、环丙沙星、亚胺培南和美罗培南有抗药性,对阿米卡星和妥布霉素敏感)则可旺盛生长,其回收率大于50%。该不动杆菌显色培养基特别适合用于不动杆菌的耐药研究。

 

对不动杆菌具体菌种的确证性鉴定可使用HiMedia公司生产的不动杆菌鉴定试剂盒(货号:KB014,HiAcinetobacter™ Identification Kit)(下图),操作方便,节省时间。

不动杆菌鉴定试剂盒包含的鉴定条含24种生化鉴定反应:

A部分:

第1孔:吲哚试验

第2孔:伏普试验

第3孔:柠檬酸盐试验

第4孔:赖氨酸试验

第5孔:鸟氨酸试验

第6孔:精氨酸试验

第7孔:硝酸盐还原试验

第8孔:丙二酸试验

第9孔:尿素酶试验

第10孔:苯丙氨酸脱氨试验

第11孔:H2S产生试验

第12孔:ONPG试验

B部分:

第1孔至第12孔:糖发酵试验

每孔接种50l菌液,35 – 37°C孵育,18-24h后即可观察结果。生化反应的结果依据每孔颜色与试剂盒中的结果诠释表对照,以判定阴性阳性,再通过菌种标准表鉴定不动杆菌菌种。

 

HiMedia公司是微生物产品生产商,一直致力于微生物培养基和细胞培养基的研发和生产,其显色培养基有80多种,涵盖各个领域,包括无动物源成分及化学限定的,并具有WHO-GMP认证、ISO9001,ISO13485认证,CE和FDA注册登记。其产品行销140多个国家。

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来的服务。

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