矿泉水中产气荚膜梭菌的检测

产气荚膜梭菌为厌氧型革兰氏阳性产芽孢的杆状菌，广泛分布于环境，在人的肠道内也有发现。在自然界的大量水体中，产气荚膜梭菌也存在，产生芽孢，并对污水处理措施和温度具有抵抗力。产气荚膜梭菌数量与水污染程度有一定的相关关系，因而也被认定是反映水质的一种指示菌。我国《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》GB8538—2016规定，天然矿泉水产品和水源水需检测产气荚膜梭菌。在该国标中，的分离培养基为亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂（简称SPS），但早有文献报道，用该培养基经24h厌氧培养后产气荚膜梭菌的黑色菌落产生不明显，容易产生漏检1。

上推荐的还有一款分离培养基为M-CP培养基。M-CP培养基初是由Bisson 和Cabelli两个微生物学家描述的，用于快速鉴定海水、饮用水和污水中的产气荚膜梭菌2。它被欧洲理事会指令98/83/EC中推荐用于人饮用水的水质检测，方法为膜过滤法3。

HiMedia生产的一款梭菌选择性显色培养基（货号M1354）即M-CP培养基。M是膜过滤法的英文个字母，CP是产气荚膜梭菌的英文简称。它用于水质微生物检测中，产气荚膜梭菌的快速分离和初步鉴定。该培养基对于产气荚膜梭菌具有更好的回收率，可用于监测各种类型的水体，包括氯消毒过的水、工业废水等。

培养基中的L-盐酸半胱氨酸为还原剂，溴甲酚紫为pH指示剂。培养基中的吲哚β-D-葡萄糖苷为显色底物，而二磷酸酚酞用于检测酸性磷酸化酶。添加的D-环丝氨酸和多粘菌素B（FD153）抑制伴随的其他菌群。用该培养基厌氧培养44 ± 1°C，21 ± 3小时即可观察结果。当黄色菌落在暴露于氨烟30秒后变为玫瑰红时，即可认为是产气荚膜梭菌。还可挑取典型菌落和非典型菌落（绿色或未变色菌落）进行进一步的验证。

M-CP培养基中所用的显色剂吲哚β-D-葡萄糖苷浓度后来进行调整，浓度降低为60mg/L而不影响其灵敏度 4，这使得整个培养基的价格下降，因而能普遍使用。

HiMedia公司是微生物产品生产商，一直致力于微生物培养基和细胞培养基的研发和生产，具有WHO GMP认证、ISO9001：2008，ISO13485：2003认证，CE认证和FDA注册登记，尤其通过CE的体外诊断注册。其产品行销140多个国家。

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，一如既往地为您带来的服务。

参考文献

1. 潘宝怡，等. 饮用天然矿泉水中产气荚膜梭菌检测国标方法的改进. 现代食品科技.2012,28(9):1236

2. Bisson, J.W., and Cabelli, V.J., 1979, Membrane filter enumeration method for Clostridium perfringens: Applied and Environmental Microbiology, v. 37. . p. 55-66

3. E.U. (1998) 98/83/EC of Council of 3rd of November 1998 on the quality of water intended for human consumption. Off. J. Eur. Commun., L330, 32-54

4. Armon, R., and Payment, P., 1988, A modified m-CP medium for enumerating Clostridium perfringens from water samples: Canadian Journal of Microbiology, v.34. p.78-79.