2017年,ISO发布了ISO 11290-1:2017,更新了李斯特菌的检测标准。该标准提供的方法针对的是2类,一类是单增李斯特菌,另一类是李斯特菌属。样品针对的是食品、饲料以及食品生产和加工的环境样品。
ISO指出,李斯特菌常少量存在,且伴随大量其他的微生物,因此选择性增菌是必要的。并且有必要检测受损伤或应激状态下的李斯特菌,因此增菌培养基应减少抑制剂的用量。
ISO还提到,单增李斯特菌的存在可能被英诺克李斯特菌和伊氏李斯特菌所掩盖。
ISO推荐的增菌培养基为半量Fraser肉汤,二次增菌为Fraser肉汤。ISO推荐的分离平板为两种,一种为Ottaviani和Agosti推荐的李斯特菌平板。另一种可自我选择,但应为固体选择性培养基,原理不同于种。在附录E里,ISO列出了一些相关信息。
对于种,世界微生物产品开发商HiMedia提供有Ottaviani和Agosti推荐的选择性培养基,品名为L. mono Differential HiVegTM Agar Base(货号为MV1540)(见下图)。该ALOA李斯特菌显色培养基不仅可以使李斯特菌旺盛生长,并鉴别不同李斯特菌物种(单增有光晕,英诺克光晕),而且抑制粪肠球菌、大肠埃希菌等杂菌生长。
对于该培养基,ISO指出,一些处于应激压力(特别是酸应激)下的单增李斯特菌菌株,可能会显示特别弱的光晕,甚至没有光晕。还有些罕见的单增李斯特菌,其 PIPLC活性慢,可能四天后才显出光晕。还有些菌属(非李斯特菌)的菌落为蓝色,容易混淆,见附录C。
对于李斯特菌的验证。ISO规定了四种试验应必须开展,即镜下观察、-溶血反应、鼠李糖发酵、木糖发酵。还有一些可选的试验,包括过氧化氢酶试验、动力学试验和CAMP试验。以上试验中,单增李斯特菌均为阳性。
在附录E中,ISO列出了一些分离平板,包括PALCAM,Oxford培养基、改良型Oxford培养基、LPM琼脂等,都可选择。HiMedia也都提供这些培养基。
缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来的服务。