新生牛血清中微生物的电镜检查

新生牛血清是细胞大规模培养用于生产疫苗、生物药及病毒载体的重要原材料，也是细胞学实验常用的天然培养基。它的质量好坏对细胞形态及生长情况的影响很大，尤其是要保证其无微生物的污染，因为微生物对细胞的污染会造成实验结果的偏差，对生物制品的安全性也构成威胁。国内外的相关部门都提出了一系列的质量检测指标。但也有人指出其不足，如对外源微生物的检测项目较少、不能涵盖所有微生物的检测；检测度也受到方法本身的限制而不能达到很高的水平。为此, 建立快速、、广谱的新生牛血清外源因子检测方法是非常必要的。

有生物制品机构开发出电镜监测微生物的方法。其主要采取的是膜表面富积法来制备电镜样品。将有膜电镜载网放入装有新生牛血清的离心管中, 5000 rPmin 离心, 然后取出载网负染。同时设立实验组和对照组。对于细菌，设置电镜放大1万倍，观察时间为 30分钟, 当5 分钟内检出细菌记为/ + + + , 10分钟检出细菌记为/ + + , 30 分钟内检出记为/ +。对于病毒，设置电镜放大3万倍，借助目镜观测, 5分钟内检出 n种记为/ n+ + +，10分钟内检出记为/ n+ +，30分钟内检出记为/ n+。研究人员选择了三种国内外不同新生牛血清的牌子，每个牌子的血清又选择了3-10个批次。结果显示，用培养基进行无菌检测时，大部分做的比较好，只有一个牌子的一个批次出现细菌检测阳性，其余皆阴性。但用电镜检查时，对照组皆为阴性，但实验组的大部分都是阳性（阳性率高达95.6%）。病毒的阳性率为34.8%。具体病毒的部分检测图像如下：

在方法上，作者认为，与膜表面富积法制备的新生牛血清电镜样品相比, 常规负染法只能获得极少的观测视野, 且附着粒子极少。而膜表面富积法所制样品可以在每个网孔取得观测视野，粒子附着率应提高104~105倍。该方法只要求血清中的微生物数量, 不要求微生物的颗粒密度，这样即使在微生物密度极低的情况下, 也能有效利用电镜进行有效检测。

作者认为，对于污染程度极低的血清, 要经过多个数量级的放大后才能在细胞

培养中体现出来。而采用针对性强的病毒检测方法不能保证血清*避免病毒污染。因此，新生牛血清生产企业应不断改进生产和检测工艺, 提高产品的质量, 满足使用单位不断提高的质量要求。

Ausbian精制新生牛血清系新西兰血源，澳洲生产，出厂前经严格质控，符合各项标准。血清经过0.22微米过滤和15kGy的gamma射线照射灭能，可杀灭细菌、支原体，无微生物风险，可满足广大用户对新生牛血清的品质需求。

品名：Ausbian精制新生牛血清

货号：VS500N

批号：1712A

规格：500ml/瓶

市场价：1600元

欢乐价：800元

*活动：买10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

参考文献

中国生物制品学杂志2004 年9 月第 17 卷第 5 期

新生牛血清中微生物的电镜检测及结果分析

作者：刘建华 梁 本 王殿军 郑晓丽 蓝志金 周丽微